请问蛋白提取出来先放-80,第二天测可以吗?
蛋白提取后立即-80°C冻存,第二天进行WB或其他检测在实验上是完全可行的,前提是操作规范,如下所述:
一、可行的前提条件
1、裂解液中已加入蛋白酶/磷酸酶抑制剂(Protease/Phosphatase Inhibitors)用于防止蛋白在冻存和解冻过程中的降解与修饰改变。
2、样品冻存前未煮沸、未反复冻融,保持蛋白原始状态,避免热变性及聚集沉淀。
3、冻存后解冻操作迅速,尽快上样或分装,避免在室温长时间放置。
二、建议保存时限(针对次日检测)
1、冻存 1天 对大多数蛋白无明显影响,包括全蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白等常规靶点。
2、如检测敏感修饰(如磷酸化、乙酰化),推荐尽快使用,不建议超过48小时。
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