WB蛋白裂解超声完不加buffer和不煮沸直接放-80两三天可以吗？
不推荐。如果不加缓冲液、不煮沸，直接-80°C冷冻2-3天，可能会导致蛋白降解或沉淀，影响WB结果；建议加缓冲液+蛋白酶抑制剂后再冷冻以确保蛋白稳定性。
可能的问题：
1、蛋白酶降解
（1）超声破碎后，细胞内容物释放，内源性蛋白酶活性可能仍然存在，如果没有加入蛋白酶抑制剂，蛋白可能会被降解，影响后续 WB 结果。
（2）冷冻（即使是 -80°C）并不能完全抑制某些蛋白酶的活性。
2、蛋白可能沉淀或变性
（1）裂解后如果不加缓冲液，蛋白可能因缺乏稳定的环境而沉淀或变性，影响 WB 结果。
（2）低温速冻（-80°C）后，蛋白可能形成不可溶沉淀，解冻时可能会影响蛋白回收和条带清晰度。
3、WB检测可能受影响
（1）如果不加缓冲液，后续上样时蛋白可能会不均匀，条带不清晰或信号降低。
（2）部分膜蛋白或易聚集的蛋白在冷冻后可能形成聚集体，影响泳动性。
4、不煮沸可能影响蛋白变性（视实验要求）
（1）煮沸（如 95°C 5min）可以破坏二级结构，确保蛋白完全变性有助于 SDS-PAGE 分离。如果你的 WB 需要变性蛋白，而你不煮沸可能影响条带分辨率。
（2）但如果 WB 采用非变性 PAGE（Native-PAGE）则可以不煮沸。
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