做质谱跑胶怎么知道是否跑到分离胶呢？

在质谱跑胶（SDS-PAGE）实验中，为了确认蛋白是否跑到分离胶，可以采取以下方法：

 

一、观察溴酚蓝指示染料

1、溴酚蓝（Bromophenol Blue, BPB）是样品缓冲液中的指示剂，它会随着电泳迁移。

2、当溴酚蓝跑到分离胶界面（约位于玻璃板 1/3 处）时，说明样品已经进入分离胶。

 

二、玻璃板透明度变化

1、浓缩胶（Stacking gel）通常是4-5%低浓度聚丙烯酰胺，较为透明。

2、分离胶（Resolving gel）浓度较高（如10%、12%、15%），相对更不透明。

3、当蛋白条带进入不透明的分离胶，即可确认进入分离阶段。

 

三、预染蛋白Marker的移动

1、预染蛋白Marker可以在电泳过程中实时监测条带位置。

2、当最低分子量的Marker进入分离胶，说明蛋白样品也已进入分离胶。

 

四、适当延长电泳时间

1、一般电泳至溴酚蓝进入分离胶下 1 cm即可保证蛋白完成进入分离胶。

2、若要确保分离效果，通常继续电泳，直至溴酚蓝接近胶底部（但不跑出）。

 

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