分离血清做代谢组学时要求样本在4度冰箱静止至少30分钟，我收集样本时血液标本被放在室温二三十分钟，又过了十几分钟才......

分离血清做代谢组学时要求样本在4度冰箱静止至少30分钟，我收集样本时血液标本被放在室温二三十分钟，又过了十几分钟才将它放在4度冰箱里半小时，这会影响实验结果吗？

 

在代谢组学检测中，血液样本的处理条件对结果的准确性至关重要；根据你描述的情况（室温放置约30-40分钟再移至4℃冰箱半小时），可能对部分代谢物的检测结果产生影响。具体分析如下：

 

一、关键影响因素

1、细胞代谢活动的持续

（1）红细胞糖酵解：室温下未离心的血液中，红细胞会继续消耗**葡萄糖**并产生**乳酸**（每小时葡萄糖降低约5-7%，乳酸升高显著）。

（2）能量代谢物降解：ATP、ADP等能量分子可能在30分钟内迅速分解（如ATP半衰期仅数分钟）。

（3）氧化应激产物：自由基敏感代谢物（如谷胱甘肽）可能被氧化。

 

2、代谢物稳定性差异

（1）易变代谢物：氨基酸（如谷氨酸、丙氨酸）、嘌呤（如次黄嘌呤）、短链脂肪酸（如丁酸）易受温度和保存时间影响。

（2）稳定代谢物：脂类（如胆固醇）、部分亲水性代谢物（如肌酸酐）相对稳定。

 

3、细胞内容物泄漏

延迟离心可能导致细胞内代谢物（如K⁺、乳酸脱氢酶）释放至血清，干扰外源性代谢物检测。

 

二、实验结果可能的表现

1、数据偏移

（1）葡萄糖显著降低（预期值可能偏离真实值10-20%）。

（2）乳酸、次黄嘌呤升高（反映细胞缺氧或能量代谢变化）。

（3）氧化脂质或蛋白修饰产物增加（如MDA，提示氧化应激）。

 

2、生物标志物可信度下降

若目标代谢物为时间敏感型（如ATP相关通路），结果可能出现假阳性/阴性。

 

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