蛋白没有加Buffer,也没有煮沸,在-20°C冰箱里能放多久呀?
未添加任何缓冲液(Buffer)且未经煮沸的蛋白质样本在-20°C冰箱中的保存时间受多种因素影响,具体分析如下:
1、短期保存(3-7天)
(1)可能的稳定性:短期内(如一周内)降解风险较低,但部分敏感蛋白质(如磷酸化蛋白、细胞因子)可能已发生明显降解。
(2)使用条件:建议仅在紧急情况下使用,需通过SDS-PAGE或活性检测验证质量。
2、中期保存(1-4周)
(1)风险显著增加:蛋白酶残留导致缓慢降解,且未变性蛋白可能形成聚集体(表现为电泳拖尾或沉淀)。
(2)建议:超过2周的样本需谨慎使用,可能已无法用于定量或功能性实验。
3、长期保存(>1个月)
(1)严重降解可能性高:未抑制的蛋白酶活性、氧化应激及反复冻融会导致蛋白碎片化或失活。
(2)结果:仅适用于非关键实验(如初筛),需通过Western Blot或质谱确认完整性。
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