请问肠道内容物在-20保存会影响非靶代谢和靶向代谢结果吗？

在肠道内容物的代谢组学研究中，样本保存温度对非靶向代谢和靶向代谢的结果有显著影响。以下是关于-20°C保存条件对代谢组学分析影响的详细解答：

 

一、保存温度对代谢物稳定性的影响

1、-80°C：是代谢组学样本保存的标准温度，极低温可以最大程度地减少代谢物的降解和转化，保证代谢组学数据的准确性。

2、-20°C：虽然在短期（如几天到一周）内可以基本保持样本的完整性，但长期保存（超过两周）可能导致一些代谢物发生降解或转化，尤其是一些对温度敏感的小分子代谢物（例如某些脂质、氨基酸和酶活性相关代谢物）。

 

二、非靶向代谢与靶向代谢的影响

1、非靶向代谢（Untargeted Metabolomics）

（1）非靶向代谢组学旨在全面分析样本中尽可能多的代谢物，包括稳定和不稳定的分子。

（2）在-20°C下保存时，某些代谢物（如短链脂肪酸、有机酸、某些氨基酸）可能降解或氧化，导致代谢物谱发生偏移。

（3）结果可能表现为一些代谢物信号减弱或消失，从而影响代谢组学数据的整体质量和可重复性。

 

2、靶向代谢（Targeted Metabolomics）

（1）靶向代谢组学专注于特定的代谢物，通常有标准品进行定量和验证。

（2）如果分析的靶向代谢物是温度敏感型分子（例如某些脂质类、短链脂肪酸、核苷酸类物质），在-20°C保存时可能会发生降解，影响定量结果。

（3）但是对于相对稳定的代谢物（例如某些氨基酸、糖类），-20°C在短期内可能不会有显著影响。

 

三、保存时间的影响

1、短期保存（<1周）： 对大多数代谢物的影响较小。

2、中期保存（1-4周）： 部分温度敏感代谢物开始降解，尤其是酶促反应相关代谢物。

3、长期保存（>1个月）： 代谢物降解、氧化和细菌或酶活性带来的变化将显著增加，显著影响代谢组学结果。

 

四、建议

1、首选-80°C保存

长期保存肠道内容物样本，建议使用-80°C冷冻。

 

2、短期保存可用-20°C

如果样本只保存几天到一周，用-20°C保存对大部分代谢物影响不大。

 

3、添加保护剂

一些代谢物可以通过添加抗氧化剂或代谢抑制剂（如甲醇、乙腈等）减少降解。

 

4、速冻保存

样本应尽快冷冻，避免反复冻融，以减少酶促反应和降解。

 

5、数据校正

在数据分析时，应考虑保存温度带来的批次效应，并在统计分析中进行校正。

 

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