我只有raw原始数据,用什么软件处理才能知道蛋白序列呢?

    从RAW原始数据(例如通过质谱仪获取的文件)解析出蛋白序列,通常需要借助专业的质谱数据分析软件和数据库搜索工具。以下是常用软件推荐:

     

    一、常用软件工具

    1、用于原始数据处理的工具

    (1)Thermo Fisher Xcalibur/Proteome Discoverer

    • 专为Thermo Fisher的质谱仪设计,可直接读取RAW数据。

    • Proteome Discoverer支持数据库搜索并输出蛋白质鉴定结果。

    • 如果使用的是其他品牌的质谱仪,可能需要其他特定软件或工具进行数据转换。

     

    (2)MSConvert (ProteoWizard)

    免费开源工具,可以将RAW文件转换为mzML、mzXML等标准格式,便于在其他软件中分析。

     

    2、用于数据库搜索和蛋白鉴定的工具

    (1)Mascot

    • 商业化数据库搜索工具,支持多种质谱数据。

    • 使用时需要一个参考蛋白质数据库,如UniProt。

     

    (2)MaxQuant

    • 免费且功能强大的质谱数据分析工具,广泛用于蛋白质组学研究。

    • 包括内置的Andromeda搜索引擎,用于数据库搜索和蛋白鉴定。

    • 支持常见的修饰分析(如磷酸化、乙酰化)。

     

    (3)SEQUEST (Thermo Fisher Proteome Discoverer)

    • 内置于Proteome Discoverer中,是Thermo系统的经典搜索引擎。

    • 和RAW数据兼容性很好,可直接解析并搜索蛋白质。

     

    (4)PEAKS

    • 专注于去标签(de novo)测序和数据库搜索。

    • 可直接从原始数据推导蛋白质序列,特别适用于没有数据库的情况。

     

    (5)Byonic

    特别适合分析修饰蛋白(如糖基化或磷酸化),支持高分辨率质谱数据。

     

    3、后续结果分析工具

    (1)Perseus

    用于处理MaxQuant的输出结果,进行进一步的统计分析、可视化和功能富集分析。

     

    (2)Skyline

    强大的定量质谱数据分析工具,可用于验证蛋白质鉴定结果。

     

    二、数据库准备

    常见的数据库包括:

    1、UniProt:全球标准的蛋白质序列数据库。

    2、NCBI RefSeq:综合性核酸和蛋白数据库。

    3、Swiss-Prot:手工注释且高精度的数据库。

    4、自定义数据库:如果研究对象是特定物种或实验设计特殊,可以用特定物种的基因组数据生成自定义蛋白质数据库。

     

    三、特殊情况:没有数据库的De Novo测序

    如果目标样本的序列没有现成数据库(例如新物种或突变蛋白),可以尝试de novo测序工具直接从质谱数据推导蛋白序列:

    1、PEAKS:支持去标签测序。

    2、Novor:专注于高效的de novo蛋白质序列推导。

    3、DeNovoGUI:开源软件,用于直接从质谱数据中推导序列。

     

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    相关服务:

    蛋白质组学生物信息学分析

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