我只有raw原始数据,用什么软件处理才能知道蛋白序列呢?
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专为Thermo Fisher的质谱仪设计,可直接读取RAW数据。
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Proteome Discoverer支持数据库搜索并输出蛋白质鉴定结果。
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如果使用的是其他品牌的质谱仪,可能需要其他特定软件或工具进行数据转换。
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商业化数据库搜索工具,支持多种质谱数据。
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使用时需要一个参考蛋白质数据库,如UniProt。
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免费且功能强大的质谱数据分析工具,广泛用于蛋白质组学研究。
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包括内置的Andromeda搜索引擎,用于数据库搜索和蛋白鉴定。
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支持常见的修饰分析(如磷酸化、乙酰化)。
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内置于Proteome Discoverer中,是Thermo系统的经典搜索引擎。
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和RAW数据兼容性很好,可直接解析并搜索蛋白质。
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专注于去标签(de novo)测序和数据库搜索。
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可直接从原始数据推导蛋白质序列,特别适用于没有数据库的情况。
从RAW原始数据(例如通过质谱仪获取的文件)解析出蛋白序列,通常需要借助专业的质谱数据分析软件和数据库搜索工具。以下是常用软件推荐:
一、常用软件工具
1、用于原始数据处理的工具
(1)Thermo Fisher Xcalibur/Proteome Discoverer
(2)MSConvert (ProteoWizard)
免费开源工具,可以将RAW文件转换为mzML、mzXML等标准格式,便于在其他软件中分析。
2、用于数据库搜索和蛋白鉴定的工具
(1)Mascot
(2)MaxQuant
(3)SEQUEST (Thermo Fisher Proteome Discoverer)
(4)PEAKS
(5)Byonic
特别适合分析修饰蛋白(如糖基化或磷酸化),支持高分辨率质谱数据。
3、后续结果分析工具
(1)Perseus
用于处理MaxQuant的输出结果,进行进一步的统计分析、可视化和功能富集分析。
(2)Skyline
强大的定量质谱数据分析工具,可用于验证蛋白质鉴定结果。
二、数据库准备
常见的数据库包括:
1、UniProt:全球标准的蛋白质序列数据库。
2、NCBI RefSeq:综合性核酸和蛋白数据库。
3、Swiss-Prot:手工注释且高精度的数据库。
4、自定义数据库:如果研究对象是特定物种或实验设计特殊,可以用特定物种的基因组数据生成自定义蛋白质数据库。
三、特殊情况:没有数据库的De Novo测序
如果目标样本的序列没有现成数据库(例如新物种或突变蛋白),可以尝试de novo测序工具直接从质谱数据推导蛋白序列:
1、PEAKS:支持去标签测序。
2、Novor:专注于高效的de novo蛋白质序列推导。
3、DeNovoGUI:开源软件,用于直接从质谱数据中推导序列。
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