甲醛固定交联后测蛋白浓度,基本测不出来,是不是这一步需要去交联后才能测浓度?
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去除交联: 为了获得准确的蛋白浓度数据,通常需要通过特定的去交联步骤(例如使用去交联剂如氨基甲酸酯、尿素等)来解除蛋白质之间的交联作用。这一步骤能够恢复蛋白质的自然结构,从而恢复其溶解性,使得浓度测定更为准确。
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使用合适的测定方法: 如果需要对交联后的样本进行浓度测定,可以考虑使用适应交联蛋白的测定方法(例如紫外吸收法),但这通常不如去交联后的测定准确。
是的,甲醛固定交联后,蛋白质的结构和溶解性会发生改变,可能会影响蛋白浓度的测定。甲醛会在蛋白质分子之间形成共价交联键,使蛋白质形成不可溶的网状结构,这样的交联蛋白质很难被传统的蛋白质浓度测定方法(如BCA、Bradford等)检测到。
解决方案:
因此,确实需要先去除交联后才能准确测定蛋白质的浓度,这是常见的实验步骤。如果不去交联,可能无法得到可靠的浓度数据。
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