在蛋白交联后,用碧云天试剂盒里的裂解液进行细胞裂解,但BCA法测定浓度很低,请问是什么原因呢？

一、在蛋白交联后使用BCA法测定蛋白浓度时，如果得到的浓度很低，可能有以下几个原因

1、交联效果：蛋白交联可能导致蛋白质的结构发生改变，使得某些蛋白质的BCA法检测位点被遮挡或不再能有效地与试剂反应，这会导致测得的浓度低于实际值。

2、试剂反应条件：BCA法对反应条件非常敏感，包括pH、温度和反应时间等。确保你在使用试剂盒时，严格遵循说明书中的操作步骤，确保各个条件适宜。

3、裂解液的影响：所用的裂解液可能会影响BCA法的灵敏度。例如，如果裂解液中含有某些化学成分（如还原剂或某些蛋白酶抑制剂）可能会干扰BCA法的反应。

4、样品稀释度：如果样品在测定前被稀释过多，可能导致最终测定的浓度在检测范围之下，进而影响结果。

5、试剂盒的过期或保存不当：确保试剂盒在有效期内，并且储存条件适当，否则可能会影响实验结果。

 

二、可以尝试以下几种方法来进一步确认问题

1、尝试使用其他蛋白浓度测定方法，如Bradford法或Lowry法，进行对比测定。

2、通过改变裂解液的成分，检查是否有改善。

3、复核实验步骤，确保所有操作均在推荐条件下进行。

 

百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商

 

相关服务：

蛋白含量分析

定量蛋白组分析

基于比色分析法的蛋白含量测定

基于氨基酸分析法的蛋白含量测定

蛋白鉴定