多肽测序解谱方法
多肽测序是生物化学研究的重要手段之一,主要用于确定蛋白质与多肽的氨基酸序列。多肽测序的主要方法有酶切法、化学合成法和质谱法。质谱法是最常用的多肽测序方法,它通过测定多肽的质谱,来推断多肽的氨基酸序列。
一、谱法
质谱法的主要步骤包括样品制备、测谱和数据分析。样品制备主要是将多肽分解成易于测定的小肽段。测谱是通过质谱仪测定多肽的质谱。数据分析是通过计算机软件对测谱数据进行处理和分析,得出多肽的氨基酸序列。
二、样品制备
样品制备主要包括多肽的纯化和酶解。纯化是为了去除样品中的杂质,提高多肽的纯度。酶解是为了将多肽分解成易于测定的小肽段。
三、测谱
测谱是通过质谱仪测定多肽的质谱。质谱仪通过加速和聚焦多肽离子,将它们引入质谱分析器进行测谱。
四、数据分析
数据分析是通过计算机软件对测谱数据进行处理和分析,得出多肽的氨基酸序列。数据分析的主要步骤包括峰值匹配、序列搜索和序列对比。

图1. 通过质谱法进行肽从头测序的过程
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