蛋白定量
蛋白质定量是蛋白质组学研究中的一个核心环节，目的是测定样本中蛋白质的表达量或浓度。蛋白质定量方法可以分为两大类：相对定量和绝对定量。
一、相对定量
1.二维电泳（2D-PAGE）：
通过比较不同样本的2D-PAGE图谱来分析蛋白质表达的变化。
2.同位素标记技术：
如稳定同位素标记氨基酸体内合成（SILAC）、同位素标记的相对和绝对定量（iTRAQ）和串联质谱标签（TMT），通过质谱分析比较不同样本中蛋白质的相对丰度。
3.标签自由定量：
直接通过质谱分析肽段的强度来比较蛋白质表达，无需前期的化学标记。
二、绝对定量
1.氨基酸分析：
通过测定蛋白质水解后氨基酸的浓度来估算蛋白质的总量。
2.标准曲线法：
使用已知浓度的蛋白质标准品制作标准曲线，与样品中的蛋白质进行比较，从而得到蛋白质的绝对浓度。
3.多重反应监测（MRM）：
结合使用特定的前体离子和产物离子对，通过质谱分析实现高灵敏度和特异性的蛋白质定量。
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