戊二醛交联蛋白实验方法
戊二醛交联蛋白实验方法如下:
1.准备溶液:
配制戊二醛溶液(常用浓度为0.1-2%)。
准备蛋白质样品(通常为1-10 mg/mL)。
2.混合反应:
将戊二醛溶液与蛋白质样品按1:1体积比例混合。
3.反应条件:
在室温或4°C反应30分钟至2小时,具体时间根据实验要求调整。
4.终止反应:
加入终止剂(如0.1 M甘氨酸)以终止反应,通常按1:1体积比例加入,反应10-30分钟。
5.清洗:
通过离心或透析除去未反应的戊二醛和终止剂。
6.检测:
使用SDS-PAGE、Western Blot或质谱等方法检测交联效果。
确保在实验过程中保持溶液的pH稳定,避免蛋白质变性。
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