质谱图怎么看蛋白磷酸化位点

    在质谱分析中,蛋白质或肽段被电离成带电粒子,然后通过质谱仪分离。质谱图显示了这些粒子的质荷比(m/z)与强度(信号大小)的关系。质谱图的解读需要理解肽段的断裂模式和磷酸化引起的质量变化。以下是解读质谱图以识别蛋白质磷酸化位点的基本步骤:


    磷酸化定量蛋白组学分析流程

    图1


    1.寻找磷酸化特征信号:

    • 磷酸化肽段在质谱图中有特定的信号。磷酸基团的加入增加了肽段的质量(约79.966 Da)。因此,在质谱图上,磷酸化肽段会在未修饰肽段的基础上显示一个相应的质量增加。
    • 在MS/MS分析中,磷酸化肽段的断裂往往导致磷酸基团的丢失(-98 Da),这可以在质谱图中观察到。

    2.分析b离子和y离子序列

    • 在串联质谱(MS/MS)中,肽段的断裂产生b系列和y系列离子。通过分析这些离子的序列,可以确定肽段的氨基酸序列。
    • 磷酸化位点附近的离子峰会表现出质量的变化,通过比较修改前后的肽段质量,可以定位磷酸化位点。

    3.使用质谱数据分析软件:

    多种软件工具(如MaxQuant、Mascot等)可以帮助识别和验证磷酸化位点,这些软件可以自动匹配肽段序列,并标注潜在的修饰位点。


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