使用Sephadex G-100纯化蛋白时,如果遇到柱子堵塞和流速极其慢的问题,可以尝试以下几种方法来解决:
1.检查柱子的装填:
确保Sephadex G-100介质在装填时均匀且没有空气泡。如果存在空气泡或装填不均,柱子的流动性会受到影响。
2.调整样品的体积和浓度:
如果样品的体积过大或者浓度过高,会导致柱子堵塞。尝试减少样品的加载量或者稀释样品。
3.提高缓冲液的强度:
有时候增加缓冲液的强度可以帮助改善流动性。例如,提高缓冲液中的盐浓度。
4.温和清洗柱子:
如果柱子已经被堵塞,可以尝试用较高盐浓度的缓冲液或含有洗脱剂的缓冲液进行温和清洗。
5.重新装填柱子:
如果以上方法都不能解决问题,可能需要重新装填柱子。这包括清洗和再平衡Sephadex G-100介质。
6.检查系统的其他部分:
确保所有连接和管路没有堵塞或泄漏,这些也可能导致流速减慢。
如果问题持续存在,可以考虑咨询制造商或寻求专业的技术支持。
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