蛋白质在电场中的泳动方向取决于
- 在非变性电泳中,蛋白质保持其天然状态并不被变性。
- 蛋白质的迁移方向取决于其在电泳缓冲液pH下的带电状态。
- 当pH < pI时,蛋白质带正电,朝向负极迁移。当pH > pI时,蛋白质带负电,朝向正极迁移。
- 在SDS-PAGE中,蛋白质与SDS结合并被变性,使其带有统一的负电荷。
- 因此,所有蛋白质都会朝向正极迁移。在这种情况下,迁移速度主要取决于蛋白质的大小,而非其带电状态。
- IEF是一种特殊的电泳,它使用梯度pH的凝胶,并在电场的作用下,使蛋白质迁移到其等电点位置。
- 在这个位置,蛋白质的电荷为零,因此蛋白质会停止迁移。
- 这是一个结合了IEF和SDS-PAGE的技术。
- 首先进行IEF,使蛋白质按其等电点进行分离。
- 然后进行SDS-PAGE,使蛋白质按其大小进行分离。在这一步,所有蛋白质都会朝向正极迁移。
- 在毛细管电泳中,样品在一个细小的毛细管内迁移。
- 蛋白质的迁移方向仍然取决于其在缓冲液pH下的带电状态以及使用的变性剂。
在不同类型的电泳中,蛋白质的迁移方向是由其带电状态以及使用的电泳条件和介质决定的。以下是几种常见的电泳类型及决定蛋白质迁移方向的因素:
1.非变性电泳 (Native PAGE):
2.SDS-PAGE(dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis):
3.等电点聚焦 (Isoelectric Focusing, IEF):
4.二维电泳 (2D-Electrophoresis):
5.毛细管电泳 (Capillary Electrophoresis, CE):
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