在应用蛋白免疫印迹检测EGFRvIII时，如何与野生型EGFR进行区分？？
EGFRvIII是一种EGFR的突变体，它在多种癌症中高度表达，包括胶质瘤和非小细胞肺癌。与野生型EGFR相比，EGFRvIII具有内部缺失的外显子，导致其在细胞内稳定存在，并且具有持续的激活状态，这使得EGFRvIII成为一个重要的癌症治疗靶点。
要区分EGFRvIII和野生型EGFR，可以采取以下策略：
1.抗体选择：
选择能够特异性识别EGFRvIII的抗体。由于EGFRvIII具有内部缺失，因此其表位与野生型EGFR不同。因此，需要选择能够特异性识别EGFRvIII的抗体，而不与野生型EGFR结合的抗体。一种常用的抗体是L8A4，它能够特异性地结合EGFRvIII。
2.细胞系选择：
使用表达EGFRvIII的细胞系作为阳性对照。在进行蛋白免疫印迹实验时，可以使用表达EGFRvIII的细胞系作为阳性对照，以确保检测到EGFRvIII的存在。同时，还需要使用野生型EGFR表达的细胞系作为阴性对照，以区分EGFRvIII和野生型EGFR。
3.分子量分析：
EGFRvIII与野生型EGFR在分子量上存在差异。EGFRvIII由于内部缺失，其分子量较小于野生型EGFR。因此，在进行蛋白免疫印迹实验时，可以通过分子量分析来区分EGFRvIII和野生型EGFR。通过比较EGFRvIII和野生型EGFR的迁移位置，可以确定是否存在EGFRvIII。
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