蛋白质电泳为什么有向负极移动的?
蛋白质电泳中,蛋白质向负极还是正极移动取决于其在电泳缓冲液中的电荷。蛋白质的电荷是由其氨基酸残基的电荷决定的,这些电荷在特定的pH下会变化。蛋白质的电荷与溶液的pH以及蛋白质的等电点 (pI) 有关。
等电点 (pI) 是指蛋白质净电荷为零的pH值。在这个pH值以下,蛋白质的净电荷为正;在这个pH值以上,蛋白质的净电荷为负。
在传统的蛋白质电泳(如Native-PAGE)中,如果电泳缓冲液的pH低于蛋白质的pI,那么蛋白质会带有正电荷并向负极迁移。相反,如果电泳缓冲液的pH高于蛋白质的pI,蛋白质会带有负电荷并向正极迁移。
然而,在SDS-PAGE中,事情有所不同。SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) 是一种阴离子表面活性剂,它会与蛋白质结合并使其呈线性结构,并赋予蛋白质一个大致均一的负电荷。这种负电荷使得蛋白质在SDS-PAGE中的移动几乎完全是基于其大小,而不是其原始电荷。由于SDS的存在,蛋白质总是带有负电荷并向阳极(正极)迁移。
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