蛋白质电泳可以分离的最小蛋白的分子量是多少?
SDS-PAGE的分离能力取决于几个因素,特别是聚丙烯酰胺凝胶的浓度。不同的凝胶浓度对于不同大小的蛋白具有最佳的分辨率。一般来说:
1.低浓度的凝胶(如4%-8%)适用于大蛋白质(>100 kDa)的分离。
2.中等浓度的凝胶(如10%-12%)可以分离中等大小的蛋白质(约25-100 kDa)。
3.高浓度的凝胶(如15%-20%或更高)适用于小蛋白质(<25 kDa)的分离。
对于非常小的蛋白质和多肽,可能需要使用20%-25%或更高浓度的凝胶来获得好的分离效果。理论上,SDS-PAGE可以分离小至约几千道尔顿(几kDa)的蛋白质和多肽,但在实践中,分离和检测非常小的多肽(如<5 kDa)可能会更具挑战性,因为它们可能会迅速地迁移到凝胶的底部并且可能难以染色。
另外,对于非常小的多肽和寡肽,另一种电泳方法——Tricine-SDS-PAGE,与传统的Glycine-SDS-PAGE相比,可能更适合分离和检测这些小分子蛋白或多肽。Tricine-SDS-PAGE是为了改进小分子蛋白质和多肽在电泳中的分离而设计的。
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