iTRAQ标记技术工作机制及其优势
- 样本质量评估与标准化处理
- 同位素标签标记优化与质控
- 基于Orbitrap高分辨质谱平台的数据采集
- 差异蛋白筛选、GO/KEGG功能富集、PPI网络分析等生信支持
在蛋白质组学的研究中，多样本高通量定量分析一直是科研人员关注的重点。随着质谱技术的发展，iTRAQ标记技术因其灵敏、准确、可多通道并行处理样本的特点，被广泛应用于疾病机制研究、药物作用机制探索和生物标志物筛选等领域。
一、iTRAQ标记技术工作机制
1、原理
iTRAQ 是基于同位素标记的蛋白质组学定量技术，其定量核心在于：对不同样本来源的肽段进行等质量的化学标记，在质谱二级碎裂（MS/MS）中释放出特异的“报告离子”，从而实现多个样本的相对定量。
2、工作流程
（1）蛋白提取与酶解：将多个样本中的蛋白提取后，统一用胰蛋白酶酶解为肽段。
（2）iTRAQ试剂标记：每个样本分别用不同编号的iTRAQ试剂进行化学标记（如114, 115, 116...最多可达8或10通道）。
（3）样本混合：标记后的肽段混合为一个样本，进入同一次质谱分析。
（4）LC-MS/MS 分析：在MS1阶段，各肽段因等质量标签而不可区分，在MS/MS阶段，标签释放出特定质量的报告离子（Reporter ions），通过其强度反映样本中肽段的相对丰度。
（5）数据分析与定量：通过报告离子强度比值，进行不同样本间蛋白表达差异的比较。
二、iTRAQ标记技术的核心优势
1、多通道并行定量，提升效率
iTRAQ最大亮点之一是可实现8通道（甚至10通道）样本的同步定量分析。相比单样本处理方法，iTRAQ极大提升了实验效率，并减少了不同批次操作带来的系统偏差。
2、同步分析，减少实验偏差
由于所有样本在标记后被统一混合、共同处理与分析，iTRAQ技术在实验流程上高度统一，能有效减少样本间的处理差异，提高数据的可比性与一致性。
3、灵敏度高，适合复杂样本
iTRAQ标记结合高分辨率质谱（如Orbitrap、QTOF）可检测并定量低丰度蛋白、膜蛋白和组织特异性蛋白，广泛适用于复杂样本类型，如血浆、脑组织、肿瘤组织等。百泰派克生物科技通过纳升流LC-MS/MS系统和深度优化的前处理流程，实现高覆盖度的蛋白组数据获取，助力科研人员发现关键调控因子。
4、适配生物信息学多维分析
iTRAQ标记技术生成的数据具备良好的归一化基础，便于与多组学（如代谢组、转录组）进行整合分析，助力系统生物学研究与网络通路挖掘。
百泰派克生物科技：助力高质量iTRAQ实验方案设计与执行
虽然iTRAQ技术在定量蛋白组学中表现优异，但其对实验操作精度、质谱平台和数据分析能力要求较高。百泰派克生物科技提供一站式iTRAQ定量服务，涵盖：
我们结合多组学整合能力，可提供iTRAQ+代谢组学联合分析、iTRAQ+磷酸化修饰研究等个性化科研解决方案。
尽管近年来TMT等新一代标签技术逐渐兴起，iTRAQ标记技术依旧以其成熟、稳定和多通道并行的特性，在特定科研场景中占据一席之地。百泰派克生物科技将以专业的技术支持和灵活的服务方案，助力您的科研项目快速推进、成果发表。联系我们，共建高效蛋白组学研究平台。
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