TMT标记的定量磷酸化蛋白组学

    TMT(Tandem Mass Tag)串联质量标签是一种基于体外肽标记的蛋白质定量技术,旨在使用串联质谱MS对不同样品中的蛋白质进行鉴定和定量。TMT定量技术将蛋白质利用TMT试剂进行标记,所有TMT试剂标签具有相同的质量,由氨基反应基团、质量平衡基团和质量报告基团组成,其中质量平衡基团和质量报告基团的分子量各不相同。因此,被TMT标记的不同来源的蛋白肽段在一级质谱中表现出相同的质荷比;在二级质谱中,通过剪切断裂释放出报告基团,由此得到离子峰强度与离子峰质荷比,通过软件结合相应数据库对离子峰强度和质荷比值进行分析,可以计算样品蛋白的含量。

    TMT技术可对多种蛋白样品进行定量鉴定,包括各种翻译后修饰蛋白,如磷酸化蛋白等。TMT标记的定量磷酸化蛋白组学即利用TMT标记定量技术对磷酸化蛋白进行定量分析,其定量方法与进行普通蛋白的原理都相同,只是由于在正常生理状态下磷酸化修饰的水平较低,因此通常需要对酶切后的磷酸化肽段进行富集,如抗体富集、IMAC富集以及TiO2富集等,以提高磷酸化修饰肽段的丰度,保证质谱检测结果的灵敏度和准确性。

    百泰派克生物科技使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC,提供TMT标记定量蛋白质组学服务技术包裹,可对各种翻译后修饰蛋白样品进行快速精确的定量鉴定,包括磷酸化蛋白、甲基化蛋白、乙酰化蛋白以及糖基化蛋白等,欢迎免费咨询。

    相关服务:
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