基于SILAC的定量MS
SILAC(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture)细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记是一种自下而上的非靶向标记蛋白质质谱定量技术,基于SILAC的定量MS即利用依赖质谱的SILAC技术进行蛋白质定量鉴定,其鉴定的原理是将正常必需氨基酸(轻标记)和同位素修饰氨基酸(重标记)掺入细胞培养物中,使新合成的蛋白质带上轻、重同位素标记,然后提取并消化细胞中的蛋白质进行LC-MS/MS分析,根据质谱中峰值强度的比率可进行相对蛋白质丰度的量化。SILAC蛋白质定量技术是进行比较蛋白质组学实验的简单可靠的方法,广泛用于研究蛋白质翻译后修饰,如蛋白质磷酸化和甲基化等,此外还可表征信号通路和确定特定的蛋白质之间的相互作用。
百泰派克生物科技使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC纳升色谱技术,提供高效精准的SILAC蛋白质定量质谱分析
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