iTRAQ与Label Free

    蛋白质是由氨基酸组成的有机生物大分子,一切生命活动都离不开蛋白质,其在体内的动态变化过程(如种类和含量的变化)揭示了生命活动的变化过程。定量蛋白质组学就是对一个体系内所有蛋白质含量进行精确地鉴定,以揭示某项生命活动的本质。定量蛋白质组学技术可分为标记(iTRAQ等)和非标记(Label Free)两类。

    iTRAQ

    iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation)是一种基于标签的蛋白质定量技术,中文名称为同位素标记相对和绝对定量。iTRAQ技术通过同位素标记来实现蛋白质定量研究,其基本的原理为:将水解得到的蛋白质多肽N末端或赖氨酸侧链基团用同位素试剂标签标记,再将该混合物进行高精度串联质谱分析,根据信号峰强度等质谱信息实现对样品蛋白的定量和定性分析。

    iTRAQ含有8种不同的试剂标签,可同时对多达8个样品进行鉴别和定量;该技术在体外对样品蛋白进行标记,检测范围广,精确度高,理论上可用于对所有物种的胞内、胞外蛋白质进行定量分析。

    Label Free

    Label Free是一种非标记蛋白质定量技术。Label Free基于液相色谱串联质谱(LC MS/MS),对蛋白酶解肽段的质谱分析数据,如质谱分析次数、质谱峰强度、不同来源样品蛋白的数量对样品蛋白质进行相对定量。

    Label Free无需使用昂贵的试剂标签就可以对样品进行高通量的定量分析,投入产出比较高,在鉴定翻译后修饰蛋白质时,Label Free也避免了由试剂标签导致的样品蛋白发生的结构上的变化,减少了实验条件带来的误差。但是Label Free在富集肽段时是分开进行的,样品之间没有进行混合,容易造成质谱重复性低,从而影响结果的准确性。

    百泰派克使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC,提供基于iTRAQ定量蛋白组分析Label Free定量蛋白组分析一站式服务。欢迎免费咨询152-0137-7680。

    相关服务:
    定量蛋白组分析
    基于Label Free的定量蛋白组分析
    基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
    DIA定量蛋白质组学
    半定量蛋白质组学分析
    2D-DIGE定量蛋白质组学
    SWATH定量蛋白组学服务

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