IP-MS互作蛋白
IP-MS(Immunoprecipitation-Mass Spectrometry)即免疫沉淀-质谱联用技术。免疫沉淀技术是一种基于抗体和抗原特异性结合的原理研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法,将细胞裂解液或组织提取液等蛋白混合体系与结合有目的蛋白的磁珠进行孵化,混合体系中能与目的蛋白相互作用的蛋白质通过特异性结合而与其他蛋白组分分离开来,再通过离心或洗脱去掉没有与目的蛋白结合的杂蛋白,从而获得与目的蛋白质相互作用的靶蛋白。
将IP免疫沉淀获得的靶蛋白通过质谱技术进行后续鉴定,即IP-MS分析。通过液相色谱串联质谱技术可以富集与目的蛋白相互作用的靶蛋白并对其进行定性鉴定,不仅可以用于验证已知的相互作用的蛋白,还可以用于寻找能与目的蛋白相互作用的未知的蛋白质分子。一次IP-MS实验,能高通量的鉴定和筛选到多个与目的蛋白存在相互作用的蛋白质,是确认目的蛋白与预期靶蛋白的特异性相互作用的首选方法。
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