互作蛋白质谱鉴定

    互作蛋白质谱鉴定是一种利用质谱技术研究蛋白质相互作用的方法,其通过免疫沉淀、亲和纯化等方法分离目标蛋白质复合物;利用蛋白质酶消化产生肽段,使用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)分析肽段;最后,基于质谱数据,结合生物信息学工具,鉴定和定量互作蛋白。互作蛋白质谱鉴定可以鉴定或验证相互作用的蛋白质,发现与目标蛋白相互作用的新蛋白,鉴定和定量互作蛋白,并揭示生物体内蛋白质信号传导通路,助力药物靶点发现和生物标志物研究,为药物开发提供依据

     

    百泰派克生物科技BTP基于Thermo Fisher的Orbitrap Exploris 240质谱平台结合Nano-LC的一站式互作蛋白质谱鉴定服务,可对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析,蛋白质样品的鉴定前处理过程严格按照Nature Methods发表的文章:Universal sample preparation method for proteome analysis进行,保证鉴定试验中得到更高的肽段覆盖率。

     

    百泰派克生物科技BTP互作蛋白质谱鉴定流程

    1.蛋白质提取:

    采用最佳的方法从细胞或组织样本中提取蛋白质,并测定蛋白质纯度和浓度,确保提取物的质量

     

    2.互作蛋白获取

    根据实验需求利用免疫沉淀、(GST)Pull-down免疫印迹方法,富集目标蛋白质及其互作蛋白。

     

    3.洗脱和富集

    将目标蛋白质复合物从结合介质上洗脱、富集并收集蛋白质样品以便进行下一步的质谱分析。

     

    4.蛋白质酶

    洗脱后的互作蛋白质组样品用多种蛋白酶(如胰蛋白酶)进行酶解,生成肽段。

     

    6.肽段分离与纯化

    利用高效液相色谱(HPLC)或反相高效液相色谱RP-HPLC)技术对酶解后的肽段进行分离和纯化 。

     

    7.质谱分析:

    通过液质联用(LC-MS/MS)对肽段进行质谱分析,获得质谱数据。

     

    8.数据处理与分析:

    对质谱数据进行数据库搜索、生物信息学分析,定性定量鉴定互作蛋白

     

    我们的优势

    1.高灵敏度与高准确度

    我们的质谱技术能够在复杂的生物样品中准确的检测到互作蛋白质,即使是低丰度的互作蛋白质也可以被鉴定具有很高的灵敏度。

     

    2.高通量:

    质谱技术能够在短时间内鉴定和定量大量的蛋白质,为研究者节省时间和实验成本。

     

    3.多样的蛋白质互作类型

    我们的服务涵盖多种蛋白质互作类型,包括同源互作、异源互作、瞬时互作和永久性互作等。

     

    4.相对无偏倚性

    相比传统的基因芯片和酵母双杂交等技术,质谱技术在检测蛋白质互作时具有相对较低的偏倚性。

     

    5.多适用性

    质谱技术可以应用于各种生物体系,如细菌、酵母、植物、动物和人类,为多种生物领域的研究提供支持。

     

    6.结构信息丰富:

    质谱技术可以提供蛋白质的翻译后修饰、剪切、蛋白-蛋白互作等多方面的结构信息,帮助研究者深入了解蛋白质功能和调控机制。

     

    关于样品

    1.总蛋白质提取物:可以从细胞、组织或生物体中提取。建议提供至少100 µg的蛋白质以确保实验成功

     

    2.富集蛋白质:对于特定目标蛋白质的互作蛋白质鉴定,您可以提供经IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物。建议至少提供 50 ug富集蛋白质。

     

    中/英文项目报告

    在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

    1. 实验步骤(中英文)
    2. 相关的质谱参数(中英文)
    3. 互作蛋白质谱鉴定详细信息
    4. 质谱图片
    5. 原始数据

     

    互作蛋白质谱鉴定一站式服务

    您只需下单-寄送样品
    百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

     

    相关服务

    Pull-down靶蛋白质谱鉴定
    蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
    蛋白质相互作用质谱分析
    免疫共沉淀法(CO-IP)结合质谱联用的蛋白互作分析
    GST融合蛋白Pull-down技术结合质谱联用的蛋白互作分析
    SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析
    蛋白质相互作用分析
    蛋白质质谱鉴定

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