互作蛋白质谱鉴定
互作蛋白质谱鉴定是一种利用质谱技术研究蛋白质相互作用的方法,其通过免疫(共)沉淀、亲和纯化等方法分离目标蛋白质复合物;再利用蛋白质酶消化产生肽段,使用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)分析肽段;最后,基于质谱数据,结合生物信息学工具,鉴定和定量互作蛋白。互作蛋白质谱鉴定可以鉴定或验证相互作用的蛋白质,发现与目标蛋白相互作用的新蛋白,鉴定和定量互作蛋白,并揭示生物体内蛋白质信号传导通路,助力药物靶点发现和生物标志物研究,为药物开发提供依据。
百泰派克生物科技BTP基于Thermo Fisher的Orbitrap Exploris 240质谱平台结合Nano-LC的一站式互作蛋白质谱鉴定服务,可对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析,蛋白质样品的鉴定前处理过程严格按照Nature Methods发表的文章:Universal sample preparation method for proteome analysis进行,保证鉴定试验中得到更高的肽段覆盖率。
百泰派克生物科技BTP互作蛋白质谱鉴定流程
1.蛋白质提取:
采用最佳的方法从细胞或组织样本中提取蛋白质,并测定蛋白质纯度和浓度,确保提取物的质量。
2.互作蛋白获取:
根据实验需求利用免疫(共)沉淀、(GST)Pull-down或免疫印迹方法,富集目标蛋白质及其互作蛋白。
3.洗脱和富集:
将目标蛋白质复合物从结合介质上洗脱、富集并收集蛋白质样品以便进行下一步的质谱分析。
4.蛋白质酶解:
将洗脱后的互作蛋白质组样品用多种蛋白酶(如胰蛋白酶)进行酶解,生成肽段。
6.肽段分离与纯化:
利用高效液相色谱(HPLC)或反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术对酶解后的肽段进行分离和纯化 。
7.质谱分析:
通过液质联用(LC-MS/MS)对肽段进行质谱分析,获得质谱数据。
8.数据处理与分析:
对质谱数据进行数据库搜索、生物信息学分析,定性定量鉴定互作蛋白质。
我们的优势
1.高灵敏度与高准确度:
我们的质谱技术能够在复杂的生物样品中准确的检测到互作蛋白质,即使是低丰度的互作蛋白质也可以被鉴定,具有很高的灵敏度。
2.高通量:
质谱技术能够在短时间内鉴定和定量大量的蛋白质,为研究者节省时间和实验成本。
3.多样的蛋白质互作类型:
我们的服务涵盖多种蛋白质互作类型,包括同源互作、异源互作、瞬时互作和永久性互作等。
4.相对无偏倚性:
相比传统的基因芯片和酵母双杂交等技术,质谱技术在检测蛋白质互作时具有相对较低的偏倚性。
5.多适用性:
质谱技术可以应用于各种生物体系,如细菌、酵母、植物、动物和人类,为多种生物领域的研究提供支持。
6.结构信息丰富:
质谱技术可以提供蛋白质的翻译后修饰、剪切、蛋白-蛋白互作等多方面的结构信息,帮助研究者深入了解蛋白质功能和调控机制。
关于样品
1.总蛋白质提取物:可以从细胞、组织或生物体中提取。建议提供至少100 µg的蛋白质以确保实验成功。
2.富集蛋白质:对于特定目标蛋白质的互作蛋白质鉴定,您可以提供经IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物。建议至少提供 50 ug富集蛋白质。
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 互作蛋白质谱鉴定详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
互作蛋白质谱鉴定一站式服务
您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
相关服务
Pull-down靶蛋白质谱鉴定
蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
蛋白质相互作用质谱分析
免疫共沉淀法(CO-IP)结合质谱联用的蛋白互作分析
GST融合蛋白Pull-down技术结合质谱联用的蛋白互作分析
SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析
蛋白质相互作用分析
蛋白质质谱鉴定
How to order?