非靶代谢组学分析步骤

非靶代谢组学分析通过高分辨率质谱技术结合先进的数据处理软件，系统鉴定和定量样品中尽可能多的小分子代谢物。首先，样品采集和处理是确保数据质量的关键环节。样品需要迅速冷冻和储存，以减少代谢变化。随后，通过液相色谱-质谱（LC-MS）或气相色谱-质谱（GC-MS）进行代谢物分离和检测。接下来，获得的质谱数据通过数据预处理软件进行峰提取、比对和归一化，以便进行下游的统计分析和代谢物鉴定。

 

在非靶代谢组学分析的后续处理中，数据解析是另一关键环节。使用多变量统计分析（如主成分分析和偏最小二乘法判别分析）帮助识别样品间的代谢差异。为了鉴定关键代谢物，通常结合使用代谢物数据库和碎片离子信息进行推测和确认。非靶代谢组学分析不仅帮助揭示已知代谢途径中的变化，还能发现新途径和生物标志物。

 

常见问题：

 

Q1. 如何确保非靶代谢组学分析中数据的可靠性？

 

A：数据的可靠性可以通过重复测量、生物学重复、使用内标进行校正以及严格的质量控制措施来确保。此外，采用合适的数据预处理和统计方法是关键。

 

Q2. 非靶代谢组学分析中如何进行代谢物鉴定？

 

A：代谢物鉴定通常基于质谱的精确质量，保留时间以及碎片离子谱。结合公共代谢物数据库（如HMDB、KEGG）和实验室自建谱库进行推测，然后通过标准品确认。

 

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