几种测定蛋白质含量方法的优劣比较
在生物学实验中,测定蛋白质含量是非常常见且重要的一个步骤。实验室中常用的测蛋白方法主要有以下几种:洛氏蛋白定量法(Lowry method)、布拉德福特法(Bradford method)、比氏蛋白定量法(Bicinchoninic Acid,BCA method)等。以下是这几种方法的优缺点比较:
一、洛氏蛋白定量法
1、优点
灵敏度高,适用于定量范围广的蛋白;不受常见非蛋白氮源的干扰。
2、缺点
步骤较复杂;由于含有重金属离子,对环境有一定污染;受两性离子螯合剂如EDTA等的影响。
二、布拉德福特法
1、优点
方法简单快速,仅需单次加样;实验过程中稳定性好。
2、缺点
受很多物质如洗涤剂等的干扰;被测蛋白与标准蛋白的氨基酸组成不同可能导致测定误差。
三、比氏蛋白定量法
1、优点
灵敏度高,适合于微量蛋白的测定;受非蛋白氮源的干扰小。
2、缺点
反应时间较长;受硫醇类还原剂的影响大。
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