用于测定蛋白质多肽链n端c端的方法

蛋白质由氨基酸排序组合而成，故有一个始端（N端）和一个终端（C端）。蛋白质的N端和C端结构和性质直接关系到其功能，因此准确测定蛋白质多肽链N端和C端的方法对于蛋白质功能的研究至关重要。本文将对测定蛋白质多肽链N端和C端的方法进行详细的科普。

一、N端测定的方法

1、Edman 降解法

早在1950年，Pehr Edman发明了用于确定蛋白质N端序列的方法，即Edman降解法。该方法首先使用Edman试剂（酚噻唑酮）、乙醇胺和盐酸，以顺序地将氨基酸从蛋白质的N端移除。然后通过色谱分析，可以识别这些氨基酸，从而确定蛋白质的N端序列。

2、质谱测序法

随着技术的发展，质谱测序法也被广泛应用于蛋白质N端测定。在质谱测序中，蛋白质先被酶切或化学方法进行切割，然后通过质谱分析对切割后的肽段进行序列测定。基于质谱测序的N端测定方法，不仅可以测定蛋白质的整体序列，而且可以对蛋白质的修饰进行分析。

二、C端测定的方法

C端测定的方法同样重要，但相对来说更为复杂。

1、制备C端肽段

首先，需要通过化学合成或蛋白酶切的方法制备C端肽段。其中，carboxypeptidase是一种常用的酶，能够从蛋白质C端顺序移除氨基酸。

2、质谱分析

制备的C端肽段可以通过质谱分析进行测定。不过由于C端肽段的离子化效率低，因此在质谱分析前往往需要对肽段进行化学修饰以提高其离子化效率。通过质谱分析，可以获取C端肽段的质量信息，从而推断出蛋白质的C端序列。

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