TMT定量蛋白质组学技术的优缺点

    TMT定量蛋白质组学因出色的多通道定量能力和稳定的定量重现性,广泛应用于生物标志物筛选、疾病机制研究、药物作用分析等多个生命科学研究领域。TMT 与 iTRAQ 类似,均为基于质谱的等质量同位素标签技术,但在灵敏度、抗干扰能力和平台适配方面展现出不同的技术特点。

     

    一、TMT定量技术原理

    TMT技术通过对不同样本中的肽段进行化学等质量标记,在质谱MS/MS阶段释放不同质量的“报告离子”,实现多样本并行定量。

    工作流程:

    1、样本蛋白提取与酶解;

    2、不同TMT标签对样本肽段进行标记(常见如TMT 6plex、10plex、11plex、16plex、18plex);

    3、标记后混合所有样本;

    4、LC-MS/MS 分析,在二级质谱中识别出不同标签对应的报告离子强度;

    5、报告离子强度反映不同样本中目标肽段的相对含量,进而回推至蛋白层面定量。

    TMT标签设计确保标记肽段在一级质谱中等质量表现,在二级质谱碎裂时释放出具有质量差异的reporter离子(例如126–131、或126–134 Da),用于定量。

     

    二、TMT定量蛋白质组学的优势

    1、高通量样本并行能力

    TMT最多可支持18通道并行分析(TMTpro 18plex),显著提升实验效率和组间比较精度,特别适用于时间序列、多分组、多重复设计的课题。百泰派克生物科技基于 TMTpro 18plex 提供多组样本一体化处理方案,有效降低批次间误差,提高数据可比性。

     

    2、抗干扰能力更强(MS3支持)

    TMT定量在MS2级别易受共碎裂干扰(Ratio compression),但TMT配套 Thermo 的Orbitrap Fusion Lumos 等平台支持SPS-MS3 模式(Synchronous Precursor Selection),可显著降低比值压缩问题,提高定量精度。相比iTRAQ,TMT具备更完整的MS3支持方案,更适合高精度定量要求的实验设计。

     

    3、定量重复性高

    TMT采用样本标记后混合、统一LC-MS分析的方式,避免了批次差异和进样不一致问题,显著提高了数据一致性和定量重复性。

     

    4、灵敏度高,适用复杂样本

    结合高分辨率质谱和纳流液相系统,TMT可实现对复杂生物样本(如血清、组织、细胞系)中中低丰度蛋白的稳定检测与定量,广泛适用于肿瘤、免疫、神经等疾病研究。

     

    三、TMT定量蛋白质组学的缺点

    1、Ratio Compression 问题(比值压缩)

    在MS2定量中,目标肽段常与背景肽段共碎裂,导致报告离子混杂,真实表达差异被低估。尤其在高复杂度样本中,此现象更为严重。

    解决策略

    (1)使用高分辨率Orbitrap Fusion Lumos质谱;

    (2)启用 SPS-MS3 模式;

    (3)优化肽段前处理与分级策略,减少共碎裂。

     

    2、设备平台依赖性强

    TMT对质谱平台要求较高(通常为 Thermo Orbitrap 系列支持度最佳),在非Orbitrap平台上实施困难,限制部分实验室独立开展。

     

    3、标记试剂成本较高

    TMT标签价格相对昂贵,尤其在大规模项目(如18通道重复设计)中,整体实验预算相对较高。因此需合理规划样本数量与分组策略,以确保投入产出比最优化。

     

    4、翻译后修饰研究需结合PTM富集

    TMT定量标记发生在肽段层面,不保留蛋白结构层面信息。如需研究磷酸化、乙酰化等翻译后修饰(PTM),仍需结合专门的修饰位点富集策略(如TiO₂富集)。百泰派克生物科技支持TMT + PTM联合分析服务,适配肽段标记与修饰位点追踪的技术需求。

     

    四、TMT定量蛋白质组学适用场景

     

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    五、百泰派克生物科技:TMT技术一站式解决方案

    百泰派克生物科技提供完整的TMT蛋白质组学技术服务,覆盖:

    • TMT 6plex/10plex/16plex/18plex多通道标签选择
    • 样本分组设计与实验规划支持
    • Orbitrap Fusion Lumos质谱系统,支持MS2与SPS-MS3模式
    • 高质量生信分析,包括差异蛋白筛选、富集分析、PPI网络构建等
    • 多组学(代谢组/转录组)联合分析服务

    我们通过标准化流程与灵活定制服务,助力科研人员以最优性价比获取高质量、可发表的TMT定量蛋白质组学数据。

     

    TMT技术具有多通道定量能力、较强的数据一致性和较高的抗干扰能力。尽管其成本和平台依赖性需考量,但对于追求数据深度、组间一致性与高精度的科研项目,TMT仍是不可替代的强有力工具。 如您计划开展TMT蛋白质组学项目,或对比TMT/iTRAQ/Label-free等策略的选型有疑问,欢迎联系百泰派克生物科技技术团队,我们将为您定制最合适的实验解决方案。

     

    百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商

     

    相关服务:

    基于TMT的蛋白质组学分析

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