百泰派克生物科技BTP客户案例:利用Edman降解测序鉴定重组Est19基因的表达蛋白

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    期刊:Biomolecules;影响因子:6.1910

    原文链接:DOI: 10.3390/ biom11111552

    研究对象:一种新的激素敏感脂肪酶Est19

    研究目的:对新的Est19进行表征

    研究手段:蛋白质组学测序等

    研究内容及结论:酯酶是一类重要的酶,具有广泛的工业应用。从南极假单胞菌中分离到一个新的激素敏感脂肪酶(HSL)家族,Est19。对E2-15进行鉴定、克隆和表达。该酶具有一个含有活性丝氨酸(S)的GESAG基序,位于高度保守的催化三联体Ser155、Asp253和His282残基中。在40℃下,Est19对pNPC6底物的催化效率(kcat/kM)为148.68 s−1 mM−1。 用天冬氨酸取代与关键催化丝氨酸并列的Glu154(E154→D)后,该酶的活性和催化效率降低了两倍,底物亲和度变化不大。野生型酶在10-60℃的温度范围内保持接近完全活性,而在0℃下保持约50%的活性。系统发育分析表明,Est19及其同源基因可能代表了HSL的一个新的亚家族。这种热稳定性和立体特异性表明,Est19酯酶可能在冷催化和手性催化中有应用价值。

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    利用Edman降解测序鉴定重组Est19基因的表达蛋白,该服务由北京百泰派克生物科技提供。SDS-PAGE结果显示,其分子量为~35 kDa,与理论分子量一致。Edman降解N-末端测序表明,在大肠杆菌中表达时没有第一个氨基酸残基Met1。

     

    参考文献:Liu X, Zhou M, Xing S, et al. Identification and biochemical characterization of a novel hormone-sensitive lipase family esterase Est19 from the Antarctic bacterium Pseudomonas sp. E2-15[J]. Biomolecules, 2021, 11(11): 1552.

     

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    北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务,业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台,服务3000+企业,10000+客户的选择,致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

     

    相关服务:

    基于Edman降解的蛋白N端序列分析

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