PRM与MRM:定量蛋白质组学的比较分析

    在蛋白质组学研究中,从靶点发现到结果验证,靶向定量技术发挥着日益重要的作用。与传统的标记定量或数据依赖采集(Data-Dependent Acquisition, DDA)方法相比,多反应监测(Multiple Reaction Monitoring, MRM)和平行反应监测(Parallel Reaction Monitoring, PRM)技术具备更高的特异性、灵敏度与重现性,尤其适合低丰度蛋白的准确检测。随着高分辨质谱技术的发展,PRM在特定应用中逐步展现出对MRM的补充乃至替代潜力。本文将从技术原理、性能特征、适用场景和数据处理等维度系统比较PRM与MRM,为研究者提供选型参考。

     

    一、技术原理对比

    1、MRM(Multiple Reaction Monitoring)采用三重四极杆质谱仪(Triple Quadrupole, QqQ),通过设定前体离子和特定产物离子的m/z对,实现高选择性的定量监测。

    2、PRM(Parallel Reaction Monitoring)则依赖高分辨率、高精度的质谱平台(如Orbitrap或Q-TOF),对目标肽段进行全产物离子扫描,从而获得更全面的离子信息。

    📌 简而言之,MRM是“点对点”监测,而PRM是“全谱段”捕获。

     

    二、性能比较:灵敏度 vs. 特异性 vs. 通量

     

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    🎯 在方法开发周期、特异性与数据完整性方面,PRM具有一定优势,而MRM在超高通量和极限灵敏度需求下仍为首选。

     

    三、应用场景差异:从大规模筛查到精准验证

    MRM 更适用于:

    • 高通量临床样本中的已知蛋白定量

    • 生物标志物验证阶段的定量分析

    • 制药行业中药物作用机制研究

     

    PRM 更适用于:

    • 低丰度、背景复杂样本中的特异性肽段验证

    • 结合DDA初筛数据进行的靶点确认

    • 需要获取完整碎裂图谱以增强可靠性的研究

     

    📌例如,在癌症标志物研究中,PRM常用于验证早期DDA识别的候选肽段,后续通过MRM在大规模样本中实现高通量检测。

     

    四、数据处理与软件支持

    两种技术均可借助如 Skyline 等开源软件进行方法开发和数据分析,但在处理流程和复杂性方面有所不同:

    1、MRM:聚焦特定离子对,数据结构清晰,处理速度快,适合标准化应用;

    2、PRM:需从全产物离子谱中提取目标信号,分析涉及谱图重建与干扰峰排除,对算法与人员经验要求更高。

     

    五、成本与仪器可达性考量

    1、MRM 依赖三重四极杆质谱,仪器相对常见,运行成本低,是很多医院和药企的常规平台。

    2、PRM 需要Orbitrap或Q-TOF等高分辨质谱,购置成本和运维成本较高,适合科研机构或高端定量需求。

     

    六、如何选择PRM或MRM?

    PRM和MRM各有千秋,关键在于明确研究目标和样本特性:

    • 若追求最大灵敏度和高通量,MRM是优选;

    • 若关注特异性与方法开发效率,PRM更具优势;

    • 在实际应用中,两者可协同互补,形成从发现到验证的完整定量闭环。

     

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