多肽药物游离巯基含量分析
多肽药物是由多个氨基酸通过肽键连接而成的生物活性分子,通常来说,它由10~100个氨基酸连接而成,相对分子质量低于10000。多肽药物大多来源于内源性肽或者天然肽,因此对人体没有副作用或者副作用很小。相比于蛋白类药物,多肽药物还具有稳定性好、纯度高、生产成本低、免疫原性低等优势,加上多肽合成技术的快速发展与成熟,使得多肽药物成为近些年生物药研发的焦点。目前,多肽药物已广泛应用于肿瘤治疗、自身免疫性疾病以及某些心血管疾病、糖尿病等的诊断和治疗,具有广阔的应用前景。
巯基在多肽药物中扮演者非常重要的角色,尤其是在二硫键的形成中。然而,有一部分巯基会以游离形式存在,这些巯基一定程度上会影响多肽药物的结构甚至是结构功能。此外,由于多肽药物在细胞系、细胞培养工艺以及分离纯化等过程中存在差异,导致这些巯基的含量也存在差异。因此,对多肽药物的游离巯基进行准确测量,对确保药物质量和疗效具有重要价值。

生物制品表征游离巯基含量分析示意图
Ellman法是检测自由巯基含量的常规方法,DTNB试剂可以与游离巯基反应生成2-硝基-5-巯基苯甲酸(TNB-),在中性或碱性pH条件下的水中,TNB-可以进一步离子化TNB2-二价阴离子。这种TNB2-离子呈现黄色,在412nm有很强的吸收。通过测定在412nm可见光吸光度就可以定量TNB2-,然后利用半胱氨酸标准品定量巯基或者基于摩尔吸收率定量巯基的方法对自由巯基进行定量。
百泰派克生物科技(BTP)采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们基于Ellman法原理建立了自由巯基定量检测平台,为您提供一站式的多肽药物游离巯基含量分析服务,只需要将您的实验目的告诉我们并寄送样品,百泰派克生物科技负责所有项目后续,包括样品处理、上机分析、数据分析和项目报告。欢迎免费咨询。
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