SILAC-IP

SILAC（Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture）技术即细胞培养条件下稳定同位素标记技术，采用含有轻、重同位素型必需氨基酸（主要是Lys和Arg）的培养基进行细胞培养，细胞传代若干代后（一般培养5-6代），细胞内蛋白质被同位素稳定标记，将蛋白质等量混合后进行分离和质谱鉴定，根据比较一级质谱图中两个同位素型肽段的面积进行相对定量。

免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）技术是基于抗体和抗原之间的特异性亲和能力，研究蛋白质相互作用或蛋白与其他物质相互作用的方法。其基本原理：可溶性蛋白抗原与相应抗体在电解质环境下形成可见沉淀物（免疫沉淀复合物），然后利用Protein A-磁珠或Protein G-磁珠将沉淀物从混合物中沉淀下来，最后将可溶性靶蛋白从磁珠上洗脱下来即可得到互作蛋白。IP技术是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法，也是用于抗原检测和纯化的最广泛使用的方法之一，主要用于抗原或者抗体的定性检测。

SILAC-IP技术即是SILAC结合IP来捕获诱饵蛋白质的互作复合物，互作复合物经预处理，再经过质谱分析即可得到复合物中蛋白质的定量及定性结果。对其进行统计分析，当实验组与对照组中某个蛋白质含量达到统计学差异时，即可判定该蛋白质与诱饵蛋白质存在互作。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q Exactive HF质谱平台，Orbitrap Fusion质谱平台，Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供SILAC与免疫共沉淀质谱联用的蛋白互作分析服务。您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的细胞寄给我们，我们会负责项目后续所有事宜，包括细胞培养、细胞标记、蛋白提取、抗体IP、效率检测、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。