血清样本脂质组送检保存注意事项

引言

血清脂质组分析能够反映机体脂质代谢状态，在心血管疾病、代谢综合征、肿瘤微环境和药物干预评价等研究中具有较高应用价值。然而，脂质分子对温度、溶氧、酶活性和时间延迟较为敏感，血清样本若在采集、分离、分装或运输环节处理不当，磷脂、甘油三酯和游离脂肪酸等组分可能在送检前即发生氧化、水解或酶促修饰，导致脂质谱偏离真实生物学状态。

许多课题组在送检血清脂质组样本时，常遇到脂质鉴定数量偏少、组间差异不显著或质控样本离散度偏高等问题。追溯样本处理记录后，往往发现症结不在上机检测环节，而在采血后室温放置过久、离心条件不统一、反复冻融或冷链运输中断等前置步骤。规范血清样本的送检前保存操作，是获得可重复、可比较脂质组数据的前提。

血清脂质组送检中的典型问题

开展血清脂质组项目时，实验室最常反馈的样本问题可归纳为以下几类：

• 采血管类型或抗凝剂与脂质组检测要求不匹配
• 血液凝固或离心后分离不及时，血清脂质的酶促降解已发生
• 血清在室温下放置时间过长，不饱和脂肪酸氧化水平升高
• 分装体积过小或管壁残留过多，影响后续提取回收率
• 样本反复冻融，脂质组成发生漂移
• 运输途中冷链中断，解冻后再冻结导致脂质谱失真
• 样本标签信息不完整，无法与临床元数据对应

上述问题若在进入质谱检测前未能识别，容易导致脂质鉴定覆盖率下降、技术重复偏差增大，甚至使组间比较失去生物学解释价值。

问题根源：脂质稳定性与操作链偏差

血清脂质组样本质量，取决于从采血到送检的完整操作链是否规范。脂质分子结构多样，涵盖甘油磷脂、鞘脂、固醇酯和游离脂肪酸等类别，不同脂质的化学稳定性存在差异。磷脂和含多不饱和脂肪酸的脂质对氧化和酶解更为敏感；部分溶血相关脂质在红细胞破裂后会释放入血清，改变原有脂质谱构成。

操作链偏差通常分布在三个环节：采集与凝固环节的血浆/血清分离不及时，离心与分装环节的条件不统一，保存与运输环节的温度控制不到位。某一环节的偏差可能单独影响特定脂质类别，多个环节偏差叠加时，则可能造成整体脂质谱的系统性偏移。厘清问题属于哪一环节，是制定保存规范的前提。



分步保存与送检指南

以下指南按血清脂质组样本处理的时间顺序整理，课题组可对照自身操作流程逐项核查。

采集前准备

采血前应明确受试者空腹状态、采样时间点、用药记录和基础疾病信息，并在样本标签中预留对应字段。脂质水平可受进食状态影响，空腹采血有助于降低餐后脂质波动带来的组间干扰。若课题设计需要特定时间点采样，应统一记录采样时刻与前一餐间隔时间。

规范采血与凝固

血清脂质组检测通常使用促凝管或标准凝固管采集静脉血，避免使用肝素抗凝管，因肝素可能干扰部分脂质提取或质谱检测流程。采血后应轻柔颠倒混匀促凝剂，避免剧烈震荡导致溶血。血液凝固时间宜控制在 30 至 60 分钟，凝固环境建议为室温，凝固完成后尽快进入离心步骤。

离心分离与分装

离心条件建议统一为 4℃ 环境、约 1500 至 2000 × g、10 至 15 分钟。离心后应尽快将血清转移至洁净的聚丙烯（PP）冻存管中，避免反复吸取造成脂质的界面吸附损失。分装体积建议不低于 200 μL，以满足脂质提取的最低用量需求，并预留重复检测用量。分装后应使用耐低温标签，标注样本编号、采样日期、处理时间和分组信息。

低温保存

血清脂质组样本宜在分装后 30 分钟内转入 −80℃ 冰箱保存。若短期内无法完成冷冻，可暂存于 −20℃ 或 4℃，但暂存时间应尽量缩短，且不同暂存温度下的样本不宜直接合并比较。长期保存推荐 −80℃，可较好维持多数脂质类别的稳定性。保存期间应尽量减少开门频次，避免温度波动。

冷链运输

送检运输应使用足量干冰或干冰包材，确保样本在运输全程保持冷冻状态。运输前需确认收件方接收时间与样本清单一致，并附送样本信息表，注明采集条件、处理时间、保存温度和冻融次数。若样本曾经历解冻，应在信息表中如实标注，便于检测方评估数据可用性。



相关服务

围绕血清及体液样本的脂质组检测与多组学整合分析，可了解以下关联服务：

脂质代谢组学研究（Lipidomics）

非靶向脂质组学

靶向脂质组学

哺乳动物非靶向脂质组学

当课题组在样本寄送前需要确认保存条件是否满足脂质组检测要求，或需要评估已有库存血清是否适合直接送检时，百泰派克生物科技可结合检测方案和样本处理记录，提供送检前评估建议与分装保存指导。

不同保存温度的适用场景

血清脂质组样本的保存温度选择，应结合保存时长和后续检测安排综合确定。不同温度条件下的脂质稳定性存在差异，课题组不宜将不同保存条件的样本直接混合分析。



4℃ 环境仅适合数小时内的短期暂存，例如采血当日完成离心分装但尚未转入低温冰箱的过渡阶段。−20℃ 可用于数天至数周的中期保存，但长期存放时部分不饱和脂质仍可能发生氧化变化。−80℃ 适合数月至数年的长期保存，是血清脂质组送检前推荐的常规保存温度。液氮气相保存适用于需要超长期留样的生物样本库，但对常规脂质组送检项目并非必需条件。

需要强调的是，无论选择何种保存温度，反复冻融都应尽量避免。每次冻融循环都可能引起脂质组成漂移，增加技术重复之间的差异。

关键操作对照表

下表汇总了血清脂质组送检各阶段的关键操作要求与常见偏差，便于实验室在送检前快速自查。

操作环节	推荐做法	常见偏差
采血管选择	促凝管或标准凝固管	使用肝素抗凝管或溶血严重
凝固时间	30 至 60 分钟，室温凝固	凝固不充分或放置过久
离心条件	4℃，1500–2000 × g，10–15 分钟	温度或转速不统一
分装材质	聚丙烯冻存管，≥ 200 μL/管	管壁吸附严重或体积不足
冷冻时机	分装后 30 分钟内转入 −80℃	室温放置超过 2 小时
冻融管理	避免反复冻融，记录冻融次数	多次冻融后仍送检检测
冷链运输	足量干冰，全程保持冷冻	运输途中解冻或干冰不足
信息记录	标注采样时间、处理条件与分组	标签缺失或元数据不完整

送检前建议由专人核对样本清单与信息表，确认保存条件一致、标签清晰可读，并与检测方提前沟通样本数量和特殊处理记录。

送检前自查与预期结果

完成上述保存操作后，血清脂质组样本应达到以下预期状态：

• 血清澄清，无明显溶血或脂血现象
• 分装管壁清洁，冷冻后样本体积与分装时一致
• 所有样本保存温度和处理流程统一
• 冻融次数不超过 1 次
• 样本信息表与冻存管标签一一对应

若送检前发现部分样本曾发生室温暴露、溶血或冻融异常，应在送检清单中单独标注，由检测方评估是否纳入正式分析批次。透明记录异常样本，有助于在数据分析阶段识别技术偏差，避免将样本处理问题误判为生物学差异。

对于批量库存血清或跨中心采集的样本队列，百泰派克生物科技可在项目启动阶段协助制定统一的采样、分装与冷链运输规范，降低批次效应对脂质组比较结果的干扰。

常见问题（FAQ）

1. 血清脂质组检测能否使用血浆样本？

部分脂质组检测方案可使用血浆样本，但血浆与血清的脂质组成存在差异，凝血过程中部分脂质会随血小板活化而变化。若课题设计指定为血清脂质组，应统一使用血清样本，不宜在同一比较组中混用血浆与血清。

1. 血清样本可以在室温下放置多久？

建议采血后尽快完成凝固、离心和分装，并在 30 分钟内转入低温保存。室温放置超过 2 小时的血清样本，部分不饱和脂质可能发生氧化，不宜作为高质量脂质组分析的首选材料。

1. 溶血样本是否适合送检脂质组检测？

溶血会引入红细胞膜脂质和血红蛋白相关干扰，可能改变血清脂质谱构成。轻度溶血样本可在信息表中标注后由检测方评估；明显溶血样本建议排除或单独分组分析。

1. 送检时至少需要多少血清体积？

具体用量取决于检测类型和提取方案，非靶向脂质组通常建议每管不少于 200 μL 血清，并预留技术重复用量。送检前应向检测方确认最低样本量要求。

1. 库存多年的 −80℃ 血清是否仍可用于脂质组检测？

多数脂质在 −80℃ 条件下可长期保存，但保存年限、冻融历史和冰箱温度波动均会影响数据质量。库存样本送检前应记录保存条件和冻融次数，必要时先进行小批量质控评估。

总结

血清样本脂质组送检保存的核心，在于从采血、凝固、离心、分装到冷冻运输的每个环节保持操作一致、温度受控、信息完整。脂质分子对时间和温度变化敏感，任何前置处理偏差都可能在上机检测前即造成脂质谱漂移，影响鉴定覆盖率和组间可比性。规范使用促凝管、及时离心分装、优先选择 −80℃ 长期保存、避免反复冻融并确保冷链运输不间断，是获得可靠脂质组数据的基本保障。若您正在规划血清脂质组检测项目，或需要评估库存样本的送检可行性，欢迎联系百泰派克生物科技技术团队，获取样本保存规范与送检前评估支持方案。