什么是蛋白质定量分析?
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Orbitrap(Thermo系列):分辨率高、灵敏度强,是多肽定量的首选
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Q Exactive系列:支持并行反应监测(PRM),适合高通量靶向定量
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TripleTOF(SCIEX):数据独立采集(DIA)效率高,适合构建蛋白图谱
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多平台定量方案(Label-Free/TMT/MRM等)灵活选择
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涵盖人、动物、微生物、植物、外泌体等多种样本类型
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全流程质控(QC)与专业生信支持
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可配合代谢组、转录组、磷酸化等多组学联合分析
蛋白质定量分析(Protein Quantification)是指测量样本中蛋白质含量或相对丰度的实验过程,在蛋白组学、疾病标志物研究、药物作用机制解析等领域具有广泛应用。通过定量分析,科研人员可以揭示不同条件下蛋白质表达的变化,从而深入理解细胞功能、疾病机制乃至药物响应过程。
一、蛋白质定量的主要类型
1、总蛋白定量(Total Protein Quantification)
这是最基础的蛋白质定量分析方式,目的是测定样品中蛋白质的总量,常用于样品标准化或实验前处理。常见方法:
(1)BCA法(Bicinchoninic Acid Assay):对蛋白浓度敏感,适用于多种样品类型。
(2)Bradford法:快速高效,但对某些缓冲体系(如SDS)敏感。
(3)Lowry法:灵敏度高,但操作相对复杂。
2、相对定量(Relative Quantification)
比较不同样本中同一蛋白的表达变化,如对照组与实验组之间的差异。主流策略:
(1)基于质谱的标记方法(如TMT、iTRAQ):通过同位素标签进行多样本对比,精度高。
(2)无标记定量(Label-Free Quantification):不需要化学标记,适合大规模样本筛查。
3、绝对定量(Absolute Quantification)
相较于相对定量,绝对定量追求更高精度,通过已知浓度的标准物质(肽段或蛋白)计算出目标蛋白在样品中的真实含量,单位可为ng/mL或copy number。主流方法:
(1)AQUA法:合成稳定同位素标记肽作为内标,适合靶向蛋白验证;
(2)QconCAT:将多个肽段串联表达形成内标蛋白,一次定量多个目标;
(3)标准曲线法:通过建立标准品浓度与峰面积关系曲线,间接计算目标浓度。
在临床标志物验证、药物靶点筛选等高精度研究中,百泰派克提供靶向MRM/SRM/PRM蛋白质定量分析服务,实现单个或多个蛋白的绝对定量分析,可用于申报FDA/CFDA相关数据支持。
二、蛋白质定量分析的质谱平台选择
现代蛋白质定量已全面迈入高分辨率质谱(HRMS)时代。热门平台包括:
百泰派克生物科技拥有多台Orbitrap Fusion Lumos和Q Exactive HF-X,配合自动化前处理系统与AI级数据分析算法,保障蛋白定量数据的高重复性、高覆盖率和低变异系数。
三、应用场景:蛋白质定量分析的科研与产业价值
蛋白质定量不仅在基础研究中至关重要,也逐步拓展至生物医药、农业、环境、合成生物等多个产业领域。
1、疾病机制研究
定量比较健康与疾病状态下的蛋白表达谱,挖掘调控网络、关键酶、炎症因子等。
2、药物研发与作用机制解析
通过处理前后蛋白表达变化,识别潜在靶点、构建药物作用通路。
3、临床标志物开发
结合代谢组与转录组筛选具有临床意义的蛋白标志物,用于早筛/预后。
4、合成生物与代谢工程
定量调控合成通路中关键酶表达,提升产物得率,实现代谢流精准调控。
四、百泰派克生物科技的定量蛋白服务优势
我们致力于为客户提供“高覆盖、高精度、高性价比”的蛋白质定量整体解决方案:
蛋白质定量分析不仅是一种技术,更是一种深入理解生命系统的科学思维方式。随着质谱技术与数据分析的不断进化,它将在精准医疗、分子诊断、合成生物学等前沿领域发挥越来越关键的作用。如果您正探索蛋白表达变化、疾病标志物挖掘、机制研究或药效评估,欢迎与百泰派克生物科技联系,我们将以专业平台与服务为您的科研之路保驾护航!
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