测定蛋白质分子量的 12 种方法
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适用于大分子蛋白的分子量测定
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高灵敏度，可以检测到低丰度蛋白
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速度快，适合高通量分析
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蛋白质鉴定
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蛋白翻译后修饰分析
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蛋白复合体研究
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适用于溶液状态下的蛋白
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高分辨率，可以区分蛋白同位素
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可用于蛋白复合体的研究
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蛋白-蛋白相互作用研究
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蛋白翻译后修饰分析
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生物药物分析
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成本低，操作简单
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广泛适用于各种蛋白质
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可用于蛋白纯度分析
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蛋白纯度检测
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蛋白分子量估算
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蛋白组分分析
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高分辨率
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适用于复杂蛋白混合物
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蛋白质组学研究
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蛋白翻译后修饰分析
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分析速度快
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样品需求量小
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高分辨率
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蛋白质分离
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蛋白结构分析
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适用于蛋白复合物分析
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可估算蛋白分子量
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蛋白聚集体研究
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蛋白复合物分析
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高分辨率
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适用于蛋白质纯度检测
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蛋白质纯化
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蛋白分子量测定
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非破坏性
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适用于大分子蛋白
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蛋白复合体研究
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蛋白聚集体分析
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适用于溶液状态蛋白
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可解析蛋白形态
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蛋白质结构研究
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无需标记
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可实时检测蛋白结合情况
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蛋白相互作用研究
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药物筛选
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适用于非变性蛋白
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高精度测量
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蛋白复合体研究
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适用于大分子蛋白
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可测定蛋白聚集状态
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蛋白质药物研究
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蛋白复合体分析
蛋白质的分子量是其基本的理化性质之一，对于蛋白质结构、功能及生物学活性的研究至关重要。准确测定蛋白质分子量对于蛋白纯化、蛋白质组学研究、药物开发、基因工程等领域具有重要意义。目前，有多种方法可用于测定蛋白质的分子量，每种方法都有其适用范围和优势。本文将详细介绍 12 种测定蛋白质分子量的方法，并分析其原理、优缺点及应用场景。
首先，我们来看看这12种测定蛋白质分子量的方法。它们包括：
（1）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
（2）毛细管电泳
（3）凝胶过滤层析
（4）超速离心分析
（5）渗透压测定法
（6）静态光散射
（7）液相色谱-质谱联用（LC-MS）
（8）基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）
（9）离子迁移谱
（10）等电聚焦电泳
（11）X射线晶体学
（12）核磁共振（NMR）波谱
1、质谱法（Mass Spectrometry, MS）
（1）基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）
MALDI-TOF 结合了基质辅助激光解析电离（MALDI）和飞行时间（TOF）技术。首先，蛋白质样品与有机基质混合，并在激光照射下被电离形成离子。随后，这些离子在电场作用下加速进入飞行管，依据其质荷比（m/z）不同，在检测器上形成不同的信号峰。
优点
应用
（2）电喷雾电离质谱（ESI-MS）
ESI-MS 采用高电压使样品溶液雾化，溶剂蒸发后形成带电离子进入质谱仪进行分析。相比 MALDI，ESI 更适合液相色谱（LC）联用，能够提供更详细的蛋白信息。
优点
应用
2、电泳法（Electrophoresis）
（1）SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）
SDS 使蛋白变性并带负电荷，使其仅依据分子量在凝胶中分离，进而估算蛋白分子量。
优点
应用
（2）双向凝胶电泳（2D-GE）
结合等电聚焦（IEF）和SDS-PAGE，蛋白质首先按照等电点（pI）分离，然后再依据分子量进行第二次分离。
优点
应用
（3）毛细管电泳（Capillary Electrophoresis, CE）
蛋白质在高压毛细管内迁移，不同分子量的蛋白迁移速率不同，从而达到分离目的。
优点
应用
3、色谱法（Chromatography）
（1）尺寸排阻色谱（SEC）
利用分子筛作用，较大蛋白先洗脱，小分子蛋白后洗脱。
优点
应用
（2）反相高效液相色谱（RP-HPLC）
依据蛋白疏水性差异分离，通过保留时间推测分子量。
优点
应用
4、物理化学方法
（1）超速离心法（Ultracentrifugation）
蛋白在高速旋转下沉降速度不同，可依据沉降系数推测蛋白分子量。
优点
应用
（2）X 射线小角散射（SAXS）
X 射线照射溶液中的蛋白，依据散射信号推测蛋白分子量。
优点
应用
（3）表面等离子共振（SPR）
检测蛋白与配体结合的光学信号变化，可推测蛋白分子量。
优点
应用
（4）气相渗透法（GEMMA）
测量蛋白气相迁移率，以推测分子量。
优点
应用
（5）光散射法（Light Scattering, LS）
测量蛋白在光照下散射强度变化，以计算蛋白分子量。
优点
应用
总结
通过了解和应用这些方法，研究人员可以在实验中选择最合适的方法以获得可靠的数据。例如，在选择测定蛋白质分子量的方法时，需要考虑样品的特性、实验的具体要求以及实验室的设备条件等因素。这些方法各自具有不同的优缺点和适用范围，研究人员应根据具体的实验需求进行选择。百泰派克生物科技提供高精度蛋白分子量测定服务，助力科研人员快速获得准确数据，为生物医药、蛋白质研究等领域提供一站式解决方案。
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