揭秘蛋白质相对分子质量测定:常用方法全面解析

    蛋白质是生物体内重要的功能分子,其相对分子质量的测定对于了解蛋白质的结构和功能至关重要。本文将介绍常用的蛋白质相对分子质量测定方法,包括凝胶电泳、质谱分析和光学方法。


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    图1


    1. 凝胶电泳

    凝胶电泳是一种常用的蛋白质相对分子质量测定方法。它通过将蛋白质样品分离成不同的带状条带,根据条带的迁移距离和已知分子质量的标准品进行比较,可以推断出待测蛋白质的相对分子质量。


    1.1 SDS-PAGE

    SDS-PAGE是一种基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,通过使用阴离子表面活性剂SDS使蛋白质带负电荷,使其在电场中按照分子质量大小进行迁移。通过与已知分子质量的标准品比较,可以确定待测蛋白质的相对分子质量。


    1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳

    聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的蛋白质分离方法,通过将蛋白质样品在凝胶中进行电泳,根据蛋白质的分子质量和电荷特性,使其在凝胶中形成不同的带状条带,从而推断出蛋白质的相对分子质量。


    2. 质谱分析

    质谱分析是一种高灵敏度的蛋白质相对分子质量测定方法。它通过将蛋白质样品离子化,并在质谱仪中进行分析,根据离子的质荷比和丰度,可以推断出蛋白质的相对分子质量。


    2.1 MALDI-TOF质谱

    MALDI-TOF质谱是一种常用的质谱分析方法,它通过将蛋白质样品与基质混合后,通过激光脱附离子化,然后通过飞行时间质谱仪进行分析。根据离子的质荷比和丰度,可以推断出蛋白质的相对分子质量。


    2.2 ESI-MS质谱

    ESI-MS质谱是一种常用的质谱分析方法,它通过将蛋白质样品在电喷雾离子源中离子化,然后通过质谱仪进行分析。根据离子的质荷比和丰度,可以推断出蛋白质的相对分子质量。


    3. 光学方法

    光学方法是一种非常便捷的蛋白质相对分子质量测定方法。它通过测量蛋白质在特定波长下的吸光度,根据比色法或比浊法,可以推断出蛋白质的相对分子质量。


    3.1 比色法

    比色法是一种常用的光学方法,通过测量蛋白质在特定波长下的吸光度,根据已知浓度的标准品和比色曲线,可以推断出待测蛋白质的相对分子质量。


    3.2 比浊法

    比浊法是一种常用的光学方法,通过测量蛋白质溶液中悬浮颗粒的光散射,根据已知浓度的标准品和比浊曲线,可以推断出待测蛋白质的相对分子质量。


    结论

    蛋白质相对分子质量的测定是生物药物研究中的重要环节。本文介绍了常用的测定蛋白质相对分子质量的方法,包括凝胶电泳、质谱分析和光学方法。这些方法各有优劣,研究人员可以根据实验需求选择合适的方法进行蛋白质相对分子质量的测定。


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