怎么测蛋白纯度高低

蛋白质纯度的测定是蛋白质研究的重要步骤，常见的测定蛋白质纯度的方法有：SDS-PAGE电泳、绝对定量（如氨基酸分析）和相对定量（如Bradford、Lowry、BCA等）法等。

 

一、SDS-PAGE电泳

SDS-PAGE电泳是最常用的分析蛋白质纯度的方法。SDS-PAGE电泳能将蛋白质分离，根据蛋白质的大小在胶上形成不同的条带。纯度高的蛋白质只会形成一条明显的条带，而纯度低的蛋白质则会形成多条条带。

 



图1 蛋白质分子筛SEC纯度分析

 

二、绝对定量

绝对定量是直接测定蛋白质的浓度，常见的方法有氨基酸分析、Kjeldahl氮测定法等。氨基酸分析是将蛋白质完全水解，然后用色谱法测定氨基酸的种类和含量，从而计算出蛋白质的含量。Kjeldahl氮测定法是通过测定样品中的总氮含量，然后根据蛋白质含氮16.7%的原理，计算出蛋白质的含量。

 

三、相对定量

相对定量是通过比较样品和已知浓度的标准品的吸光度，计算出样品的蛋白质含量。常见的方法有Bradford、Lowry、BCA等。这些方法都是通过蛋白质与试剂反应产生颜色，然后测定吸光度来测定蛋白质的含量。其中，Bradford法的优点是快速、简便，没有多余的蛋白质对测定结果产生干扰。

 

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