lowry法测蛋白质含量
Lowry法是一种常用的测定蛋白质含量的方法,由Lowry等人于1951年首次提出,基于蛋白质与铜离子(在碱性条件下)和Folin-Ciocalteu试剂反应的原理。首先蛋白质与铜离子在碱性条件下形成络合物,然后再与Folin-Ciocalteu试剂进行氧化还原反应,生成有色物质。该物质的颜色深浅与蛋白质的含量成正比,可利用分光光度计在750nm波长处进行测定。
一、操作步骤
1.取待测样品,加入适量碱性铜液,充分混匀,常温下静置10分钟。
2.加入适量的Folin-Ciocalteu试剂,充分混匀。
3.常温下静置30分钟。
4.在750nm波长处用分光光度计进行测定。
二、优点
Lowry法是一种敏感性较高的测定蛋白质的方法,可用于测定微量蛋白质,且操作简便。
三、缺点
Lowry法的缺点是不能与某些试剂共存,如还原糖、某些氨基酸等,这些物质会影响结果的准确性。
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