高效液相色谱的正相与反相应用
高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)可以是正相色谱(Normal Phase HPLC)或反相色谱(Reverse Phase HPLC),这取决于使用的色谱柱和流动相的性质。
1.正相色谱:
在正相HPLC中,色谱柱填充物是极性的(例如硅胶),而流动相是非极性或中等极性的溶剂。在这种设置中,极性分子在柱中的保留时间更长,因为它们与极性固定相有更强的相互作用。
2.反相色谱:
相比之下,反相HPLC使用非极性或弱极性的色谱柱填料(如疏水的烷基硅烷化合物,例如C18),而流动相是极性的。在反相色谱中,非极性分子在色谱柱中的保留时间更长,因为它们与非极性固定相有更强的相互作用。
在实际应用中,反相HPLC更为常见,特别是在生物分析和有机分子分析中。这是因为反相色谱柱对于多数生物分子和有机化合物而言具有更好的相容性和分离效率。
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