质谱流式细胞技术流程:实现细胞级蛋白质分析的关键步骤
1.质谱流式细胞技术概述
质谱流式细胞技术(Mass Cytometry)是一种基于时间飞行质谱的细胞分析技术,可以在单个细胞级别上分析数十甚至上百个参数,为解析细胞的复杂性和异质性提供了强大的工具。
2.样品制备
使用质谱流式细胞技术的首个步骤是样品制备。这通常涉及对单个细胞的收集,随后进行必要的处理以用于后续的标记过程,如固定、渗透和阻断等。
3.抗体标记
在样品制备后,接下来是使用稀土金属标记的抗体进行标记。每种抗体都针对特定的生物标志物,如蛋白质或磷酸化位点,并且每种抗体都通过特定的稀土金属进行标记,使得它们可以在后续的质谱分析中被区分开来。
4.数据获取
在完成抗体标记后,样品被送入质谱流式细胞仪器。在仪器中,样品被气化并被电离,然后通过时间飞行质谱仪进行分析。每个细胞被检测到的金属离子信号反映了该细胞中对应生物标志物的量。
5.数据分析
获得的原始数据需要经过专门的软件进行处理和分析,包括质控、标准化、聚类分析等,以识别不同的细胞群体和它们的功能状态,从而得到生物学意义。
质谱流式细胞技术的流程,尽管涉及到多个复杂的步骤,但每一步都至关重要,缺一不可。这个流程成功地实现了在单个细胞级别上的高参数蛋白质分析,提供了前所未有的深度和广度来理解细胞的复杂性和异质性,这对于生物学研究,特别是生物药物研究具有重大意义。通过质谱流式细胞技术,我们可以深入探索细胞在不同状态下的蛋白质表达和功能,揭示生物过程和疾病发生发展的细胞机制,为疾病的诊断和治疗提供关键信息。
图1
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