流式细胞质谱

流式细胞质谱（CyTOF，Cytometry by Time-Of-Flight）是一种结合了流式细胞术和时间飞行质谱技术的分析方法，用于同时检测单个细胞表面和内部的多种标记物。与传统的流式细胞术相比，CyTOF可以检测更多的参数，因为它不受荧光标记物光谱重叠的限制。这使得CyTOF成为一种强大的工具，用于细胞表型的深入分析和复杂细胞群体的研究。

一、工作原理

标记：首先，使用含有不同稳定同位素的重金属标记抗体对细胞样本进行标记。每种抗体特异性地结合到细胞的特定标记物上。

雾化和电离：标记的细胞样本通过喷嘴被雾化成单个细胞微滴，并在高温下电离，使绑定在细胞上的重金属标记释放出来。

时间飞行质谱分析：释放的金属离子被送入时间飞行质谱仪（TOF MS），根据它们的质量/电荷比（m/z）进行检测和鉴定。

数据分析：每个细胞的金属离子强度反映了其表面和内部标记物的表达水平，通过专门的软件进行数据分析和可视化。

二、优势

高参数：能够同时分析多达40种以上的标记物，远超过传统流式细胞术的能力。

最小化光谱重叠：使用重金属标记，避免了荧光标记中的光谱重叠问题。

单细胞分析：提供单细胞水平的高维度数据，适合研究细胞异质性和复杂细胞网络。

三、限制

样本处理时间：标记和准备过程比传统流式细胞术更为复杂和耗时。

成本：CyTOF设备和重金属标记抗体的成本较高。