质谱流式技术
流式细胞术(Flow Cytometry)是最经典的单细胞分析技术,可以对单细胞中的多个参数进行检测,从而对样品进行亚群和功能分析。传统的流式细胞术一般是基于荧光发射光谱的检测,由于荧光基团发射光谱较短,多参数检测时,不同荧光素发射之间往往会发生重叠,这就会导致检测通量受限,检测难度增加。为了保证数据精确,多参数检测时必须进行荧光补偿调节,大大增加了检测的复杂性,这也是传统荧光流式细胞术难以攻克的技术难题,而质谱流式细胞术( Mass Cytometry) 恰能很好地解决这一难题。
质谱流式技术(Mass Cytometry)是利用质谱原理对单细胞进行多参数检测的流式技术,能够在单细胞水平实现超过50种标志物。相比与流式细胞术,质谱流式技术可以准确区分不同原子质量的金属同位素,而不会出现通道重叠。这不仅改善了对复杂补偿基质的需求,而且能够同时分析比荧光流式细胞术更多的细胞特征。

图1(A)传统流式细胞术和质谱流式技术重叠的比较(B)质谱流式技术工作流程
质谱流式技术的核心是将流式细胞术与电感耦合等离子体飞行时间质谱(ICP-TOF-MS)融合。其原理是首先用稳定金属同位素标记抗体, 然后将抗体与细胞表面相应标志物特异性结合, 达到细胞被金属元素标记的目的。被标记的细胞通过雾化器,形成单细胞液滴流,经过等离子体炬管时进行去溶剂化和电离,接着经过射频四极杆去除常见生物元素(如C、N等), 富集重金属离子,最后垂直引入飞行时间质量分析器,按不同质荷比在不同时间被检测器捕获。这样细胞标志物的类型(金属标签元素种类)和表达水平(金属标签信号强度)会变成相应数据,用于之后的数据分析。

图2.质谱流式技术的基本原理
质谱流式技术作为一种新型的高维多参数的单细胞分析技术,可精确全面的分析细胞群免疫分型及细胞内信号网络,目前已被广泛的应用于生物标志物、疾病分型、细胞治疗、药物研发等生物学及医学研究等诸多领域。百泰派克生物科技单细胞质谱流式技术分析,采用了金属标记抗体技术,可同时检测51个目标蛋白,同时分析至少105的细胞,通量高,成本低,出结果速度快,对于研究细胞亚群的变化具有重要意义。
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