Edman降解法N端序列分析

N端序列与蛋白质的功能和稳定性息息相关，对蛋白质进行N端测序分析，可以确定蛋白质的起点，有利于帮助分析蛋白质的高级结构，揭示蛋白质的生物学功能。Edman降解法（Edman degradation）通过逐步移除蛋白质N端的氨基酸并识别其类型，以测定蛋白质或多肽N端氨基酸序列。Edman测序反应是一个循环过程，即在弱碱性条件下使多肽/蛋白与异硫氰酸苯酯（PITC）反应，然后用酸处理，从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸的苯基乙内酰硫脲衍生物的形态游离出来，然后对分离出的氨基酸进行鉴定，每一轮反应可鉴定一个氨基酸，如此循环，最后实现N末端氨基酸序列的鉴定。

Edman降解法N端序列分析示意图

百泰派克生物科技BTP基于岛津公司Edman测序系统建立了N端序列分析平台，并通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，为广大科研工作者和科研客户提供纯化后蛋白产物、抗体、蛋白疫苗、重组胶原蛋白等的N端测序服务。采用我们的测序系统，可以测定N端30个氨基酸的序列信息。采用特定的蛋白上样系统，可以测定N端的60-70个氨基酸。欢迎免费咨询，了解更多详细信息！

实验仪器

全自动蛋白质/多肽测序仪（PPSQ33A）

技术优势

通过跑胶转膜或者点膜的方式进行样品处理，可以直接分析氨基酸信息，不需要任何蛋白质数据库就可以准确分析N端氨基酸序列；
能准确辨别异亮氨酸和亮氨酸、谷氨酰胺和赖氨酸；
能准确识别和鉴定全长序列中混有的截断体（N-1, N-2等）；
准确测定包含大量重复片段蛋白的序列。

案例示意

为对19种PTH-氨基酸进行校准，故先测试19种PTH氨基酸的混合标准品，校准测试混合标准品图谱如下：

标准品校准测试图谱

PTH氨基酸混合标准品校准测试完成后，测试样品的N-端序列，样品测试图谱如下：

N端第1位

N端第2位

N端第3位

通过上述图谱可以确定蛋白质N端序列为Tyr-Val-Trp。

中/英文项目报告

在技术报告中，百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告，报告包括：

1. 实验步骤（中英文）
2. 相关的质谱参数（中英文）
3. Edman降解法N端序列分析详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据