HCP覆盖率检测

生物技术药物往往是借助工程细胞进行大规模生产，在生产过程中，这些宿主细胞会分泌其他蛋白质，伴随着细胞老化破裂产生的大量胞内蛋白等，形成与产品不相关的杂质，统称为宿主细胞蛋白质（host cell protein，HCP）。HCP的存在可能导致产品不稳定、疗效差等质量风险，还能引发病人的免疫副反应等安全风险。因此，需要证明HCP多克隆抗体能识别HCP的比例，即覆盖率（Coverage），对HCP覆盖率进行检测和评估。覆盖率评估属于定性分析，要求是稳定性好，灵敏度高，确保结果准确可靠。

HCP抗体覆盖率的评估方法一般会采用双向电泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）和蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术结合的办法，即2D-Western Blot。目前常采用的是2D-Western Blot中的双向荧光差异电泳技术（Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis，2D-DIGE）以实现采用不同荧光标记和荧光显色的方法在一块二维电泳胶上进行HCP抗体覆盖率的检测分析。这在一定程度上提升了评估的准确性，节省了时间和试剂花费成本等。然而，基于电泳的技术依赖高质量的电泳结果，要求染色蛋白质点清晰，且在结果分析的过程中人为判定的影响较重，容易导致结果不可靠。

现阶段许多方案中都会使用2D-Western Blot（如2D-DIGE）方法进行覆盖率检测，并将HCP抗体检测与凝胶内总蛋白质染色进行比较。这种类型的覆盖分析使您能够预估覆盖率的百分比，并可以指导您使用更具体的ELISA或正交分析（如质谱分析）。用高分辨质谱方法取代2-DE方法可准确鉴定HCP样品中所包含的蛋白种类和相对丰度，再结合HCP多抗能识别的蛋白质种类进行匹配计算可得到更真实的覆盖率，质谱法可对HCP多抗识别到的HCP蛋白进行进一步定性和定量鉴定析。

百泰派克生物科技提供生物制药分析服务，其中包括宿主蛋白残留（HCP）分析服务。百泰派克生物科技具有经验丰富的技术人员，可以提供从实验设计、样品检测、数据分析等全套专业服务，可精准检测生物药物可能残留的宿主蛋白。