测定圆二色谱的样品前处理

圆二色谱即圆二色光谱，是一项依据光学活性分子的圆二色性（circular dichroism，CD）发展而来的光谱分析技术。光学活性分子具有不对称空间结构，当平面偏振光经过光活性物质时，其对左、右圆偏振光的吸收度不同，导致左、右圆偏振光变成椭圆偏振光，常用于解析这些分子的二级和三级构象。大多数具有活性的生物大分子由于其不对称的空间结构都具有光学活性，均可作为圆二色谱研究的对象，如典型的蛋白质。

利用圆二色谱进行蛋白质或多肽结构分析时，首先要制备满足检测条件的样品，需要注意的是缓冲液的选择、蛋白浓度以及纯度。圆二色谱通常以蛋白稀溶液为检测对象，因此需将蛋白样品完全溶解在缓冲液或溶剂中，使其形成均一、透明的蛋白溶液。缓冲液和溶剂的选择特别重要，成分中应尽量避免任何含有光吸收的物质，以免产生杂信号造成实验误差。最好选择透明性极好的磷酸盐和Tris-HCl等作为缓冲液。此外，蛋白质/多肽的精确浓度是计算样品二级结构的关键，一般应保证蛋白/多肽的浓度不低于0.5 mg/mL。样品不能添加任何保护剂或其它物质，蛋白/多肽纯度要在90%以上。

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相关服务：
蛋白质圆二色谱分析
蛋白质结构鉴定
蛋白质二级结构测定
蛋白一级结构测定
基于质谱的序列分析
蛋白二硫键鉴定和定量分析