Pull down
Pull down实验,又称拉下实验,是一种体外亲和纯化技术,蛋白Pull down技术可以提供一种诱饵蛋白来特异性识别配体蛋白质,以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的,是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。
蛋白质Pull down将被亲和试剂标签(如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素)标记的诱饵蛋白固定在某种固体基质(如琼脂糖)上,当目标蛋白或细胞、组织抽提液流经该基质时,可与该诱饵蛋白相互作用的配体蛋白被捕获,通过改变洗脱液或洗脱条件回收被捕获的蛋白,再利用蛋白质印迹或质谱方法检测这种互作关系。
蛋白Pull-down可用于证实已知的蛋白或肽的相互作用,也可以用来发掘未知的蛋白或肽的相互作用。但是蛋白质Pull down技术是一种体外亲和纯化技术,在一定程度上不能真实的反应细胞内蛋白质之间的相互作用,因为在体外相互作用的蛋白质在正常生理条件下不一定会相互结合。
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相关服务:
Pull down靶蛋白质谱鉴定
GST pull-down蛋白相互作用分析
CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析
蛋白互作分析
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