如何测定蛋白质的一级结构

蛋白质的一级结构，又称初级结构，是指蛋白质的氨基酸排列顺序以及二硫键的位置和数量。蛋白质的一级结构是形成高级结构的基础，一级结构的测定在一定程度上也有助于高级结构的预测。

常用的蛋白质一级结构测定方法包括蛋白质测序法、DNA测序法以及质谱测序法等。蛋白质测序法以C端/N端测序为主，主要对蛋白质两端的氨基酸序列进行测定。DNA测序法根据已经测定的部分氨基酸序列设计引物，扩增出其mRNA，从而推断蛋白质的全部氨基酸序列。质谱法将已知分子质量的、纯化后的蛋白酶解为小片段多肽并进行序列分析，根据小肽段之间的重叠区确定小肽段的排列顺序，依此推演整条多肽链的氨基酸序列。