抗体等电点怎么测定
单克隆抗体（mAbs）的一个重要特征是它们的等电点（pI），其本质上是抗体没有净电荷的pH值，其值取决于抗体所含的带电氨基酸。如果周围环境的pH值低于抗体的pI，则分子携带净正电荷；而当pH值高于pI时，抗体将携带净负电荷。在评估治疗性抗体的药代动力学（PK）特性时，不仅靶向介导的药物处置（TMDD），而且非靶向相关机制也会影响整体PK行为，pI可能是后者的重要因素。此外，由于在产品开发的早期临床前阶段选择最佳候选药物可以大大减少开发时间和成本，因此在药物发现和开发过程中考虑去风险策略和工具非常重要，包括抗体可变区域电荷和抗体pI分析。
抗体pI测定方法较多，常见的有沉淀法和经典的等电聚焦电泳法。随着生命科学技术的发展，等电聚焦电泳法也得到了改进，如全柱成像毛细管等电聚焦（icIEF）和压力介导毛细管电泳（PreMCE）等。新开发的一种基于PreMCE改进版本的简单方法，可用于测定具有紧密间隔pKa的两性电解质的等电点。这种新的pI测定PreMCE方法（i）可以在大多数商业毛细管电泳仪器上轻松执行；（ii）它可以使用小的、不纯的样品，（iii）与自然pH梯度中的等电聚焦方法不同，它不需要线性pH梯度，并且（iv）它消除了由于色谱保留在分离室壁上的pI误差。此外，还可以通过振荡法与计算机算法结合进行蛋白等电点的测定，用Visual Basic编写的程序来计算蛋白质和其他带有酸碱性残基的大分子的等电点，理论上可以计算出所需精度的pI值，计算机自动提供蛋白质电荷与pH值的表示，相应的值也可以命令以表格的形式获得。
百泰派克生物科技基于毛细导管等电聚焦（cIEF）提供蛋白等电点的测定一站式技术服务，相比传统平板法，cIEF具有短时高效、精确度高、样本用量少等优点。该技术适用于多种氨基酸、多肽、重组蛋白、酶类、单克隆抗体等，并已广泛应用于临床分析，欢迎免费咨询！
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