Edman测序

Edman测序原理

Edman测序又称Edman降解法测序，是由埃德曼在上世纪50年代创立的用于测定蛋白质一级结构的方法。Edman测序基本原理是将蛋白多肽的N端氨基酸用化学方法依次断裂，每次只断裂一个氨基酸，通过高效液相色谱（HPLC）分析断裂后氨基酸片段，再将少了一个氨基酸的多肽链回收，重复进行以上操作，直到最后鉴定出整条多肽链的氨基酸排列顺序。

Edman测序技术

Edman测序技术每一次循环只能鉴定一个氨基酸，大致流程如下：首先利用异硫氰酸苯酯（PITC）特异性识别并连接在待测蛋白质的N端氨基酸上形成PITC-蛋白复合物；在酸处理条件下，PITC连接的N端氨基酸被切割，形成不稳定的PITC-氨基酸复合物；被萃取的PITC-氨基酸复合物在酸性条件下转化为稳定的苯基乙内酰硫脲（PTH）衍生物；最后利用HPLC鉴定氨基酸种类。

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