百泰派克生物科技BTP客户案例：利用纳米级液相色谱结合串联质谱（nano LC-MS/MS）检测重组蛋白的表达

期刊：Toxins；影响因子：5.3054

原文链接：DOI: 10.3390/toxins14020147

研究对象：白纹伊蚊

研究目的：通过结合两种杀蚊病原体来提高病毒毒性以杀灭蚊子

研究手段：蛋白质组学等

研究内容及结论：蚊子病毒（MDVs）是一种蚊子特异性病毒，推荐作为蚊子生物防治剂。埃及伊蚊丹麦病毒（AeDNV）是一种很好的控制蚊子的候选病毒。然而，缓慢的研究进展限制了它们在病媒控制方面的广泛应用。在本研究中，作者将苏云金芽孢杆菌（Bti）毒素Cry11Aa结构域II环α8和Cyt1Aa环β6-αE肽导入AeDNV基因组，以提高其杀蚊效率；采用纳米级液相色谱结合串联质谱（nano LC-MS/MS）检测重组蛋白的表达。将重组质粒转染到蚊子C6/36细胞系中，并通过RT-PCR检测特异性肽的表达。对1龄白纹伊蚊幼虫的毒性生物试验表明，重组AeDNV的致病活性显著高于野生型（wt）病毒，死亡率呈剂量依赖性增加。重组病毒遗传稳定，表现出与野生型AeDNV相似的生长表型和病毒增殖能力。该研究的新结果通过结合两种杀蚊病原体来提高病毒毒性以控制蚊子，从而提供了进一步的见解。

利用纳米级液相色谱结合串联质谱（nano LC-MS/MS）检测重组蛋白的表达，该服务由北京百泰派克生物科技提供。纳米LC-MS/MS分析显示环α8和环α8Cyt肽段检测成功，序列覆盖率为100%，表明重组蛋白得到成功表达。

参考文献：Batool K, Alam I, Liu P, et al. Recombinant Mosquito Densovirus with Bti Toxins Significantly Improves Pathogenicity against Aedes albopictus[J]. Toxins, 2022, 14(2): 147.

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